典型文献
北细辛AhOMT1基因的克隆及原核表达分析
文献摘要：
为进一步挖掘甲基丁香酚合成相关酶基因,解析北细辛次生代谢途径,根据北细辛转录组数据库信息,筛选和克隆了AhOMT1基因,并进行了相应的生物信息学分析及原核表达分析.结果表明,AhOMT1基因包含的开放阅读框为1089 bp,编码362个氨基酸,理论分子质量为40.23 ku,等电点为5.34,AhOMT1蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构,无信号肽序列;AhOMT1基因具有二聚化结构域与甲基转移酶结构域,AhOMT1与催化类黄酮、丁香酚类化合物的O-甲基转移酶的同源性较高;构建pET-32b-AhOMT1原核表达载体,成功诱导表达约60 ku的重组蛋白;确定了最佳诱导条件是0.2 mmol/L IPTG,16℃诱导16 h,该诱导条件下的重组蛋白多以可溶性蛋白形式存在;使用Ni2+树脂分离纯化AhOMT1蛋白,以200 mmol/L咪唑洗脱可得到最大量的蛋白.该研究首次克隆了北细辛AhOMT1基因,构建原核表达载体,筛选出AhOMT1蛋白最佳诱导条件.
文献关键词：
北细辛;AhOMT1;基因克隆;生物信息学分析;原核表达
中图分类号：
作者姓名：
王亚男;梁岩岩;严文培;张银萍;李强;吴秀菊
作者机构：
东北农业大学 生命科学学院,黑龙江 哈尔滨 150030
文献出处：
引用格式：
[1]王亚男;梁岩岩;严文培;张银萍;李强;吴秀菊-.北细辛AhOMT1基因的克隆及原核表达分析)[J].华北农学报,2022(04):62-70
A类：
AhOMT1,32b
B类：
北细辛,表达分析,甲基丁香酚,酶基因,次生代谢,代谢途径,转录组数据,数据库信息,生物信息学分析,开放阅读框,bp,分子质量,ku,等电点,亲水性,膜结构,信号肽,肽序列,二聚化,结构域,甲基转移酶,酶结构,类黄酮,丁香酚类,酚类化合物,同源性,pET,原核表达载体,诱导表达,重组蛋白,诱导条件,IPTG,可溶性蛋白,Ni2+,树脂分离,分离纯化,咪唑,洗脱,基因克隆
AB值：
0.290711
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
