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环介导恒温扩增结合纳米横向流生物传感技术对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌快速检测方法的建立与应用
文献摘要：
目的 基于环介导恒温扩增结合纳米生物传感技术(loop-mediated isothermal amplification combined with nanoparticle-based lateral flow biosensor,LAMP-LFB)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococ-cus aureus,MRSA)快速、准确、便捷检测技术的构建及应用评价.方法 以MRSA菌株特异性基因mecA为检测靶点,设计并修饰LAMP引物.采用实时浊度仪、孔雀石绿扩增指示剂(Malachite green,MG)及纳米生物传感器(nanoparticle-based lateral flow biosensor,LFB)为检测手段对LAMP扩增产物进行鉴定.对MRSA-LAMP-LFB检测体系的扩增温度和扩增时间进行优化,分析MRSA-LAMP-LFB检测方法灵敏性和特异性.应用微生物培养技术,PCR技术和新构建的MRSA-LAMP-LFB方法分别对48份临床疑似MRSA感染患者全血样本进行检测,进而评价MRSA-LAMP-LFB技术的临床应用性.结果 MRSA-LAMP-LFB技术优化后的反应条件为67℃,40min.该技术的检测结果可直接通过观察LFB板条上的CL和TL条带显色进行结果判定.该技术的灵敏度为100 fg/μl(32 copies/μl),其检测特异性为100％,与非MRSA菌株无交叉反应.经临床样本验证,LAMP-LFB技术对MRSA的检测结果与传统的"细菌培养-药敏鉴定"检测结果一致,其灵敏度高于传统的PCR方法.结论 基于LAMP和LFB技术建立的MRSA-LAMP-LFB检测方法特异性强、灵敏度高,能准确、快速地检测MRSA菌株,能为临床用药和MRSA防控提供准确、快速的实验室诊断依据.
文献关键词：
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;纳米横向流生物传感;环介导恒温扩增;快速检测
中图分类号：
作者姓名：
郑燚;刘蕊;余广利;晏莉霜;么乙峥;陈旭
作者机构：
贵州中医药大学第二附属医院,临床医学实验室,贵州贵阳550003
文献出处：
引用格式：
[1]郑燚;刘蕊;余广利;晏莉霜;么乙峥;陈旭-.环介导恒温扩增结合纳米横向流生物传感技术对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌快速检测方法的建立与应用)[J].现代预防医学,2022(20):3782-3787,3811
A类：
纳米横向流生物传感
B类：
环介导恒温扩增,生物传感技术,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,快速检测方法,建立与应用,loop,mediated,isothermal,amplification,combined,nanoparticle,lateral,flow,biosensor,LAMP,LFB,methicillin,resistant,Staphylococ,cus,aureus,MRSA,便捷检测,构建及应用,应用评价,菌株特异性,特异性基因,mecA,引物,浊度仪,孔雀石绿,指示剂,Malachite,green,MG,纳米生物传感器,检测手段,扩增产物,检测体系,增温,灵敏性,微生物培养,培养技术,感染患者,全血样本,技术优化,反应条件,40min,接通,通过观察,板条,CL,TL,条带,显色,结果判定,fg,copies,交叉反应,临床样本,细菌培养,药敏,灵敏度高,法特,临床用药,实验室诊断,诊断依据
AB值：
0.351371
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