背景和目的:胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)是目前常见的恶性脑部肿瘤之一,但GBM相关发病机制仍不完全清楚.本研究旨在分析锌指DHHC结构域蛋白(zinc finger DHHC domain-containing protein,ZDHHC)12对Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)的调控,以及ZDHHC12/YAP1轴对GBM肿瘤特性的调控.方法:在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库以及基因型-组织表达(Genotype-Tissue Expression,GTEx)数据库中分析ZDHHC12分别在正常脑组织及GBM中的表达情况,运用蛋白质印迹法(Western blot)以及实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测,分析在U87、U251以及人正常星形胶质细胞(NHA)的mRNA表达及蛋白水平.在U87和U251两种GBM细胞系中通过设计的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲低ZDHHC12,并验证YAP1蛋白水平的变化.通过免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)验证内源性及外源性ZDHHC12及YAP1的相互关系.通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验、细胞平板克隆形成实验、划痕实验分析GBM细胞敲低ZDHHC12后在增殖及迁移能力上发生的改变.检测在敲低ZDHHC12后GBM细胞系中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物变化.分析ZDHHC12对GBM患者预后的影响.并检测在不同组织样本中ZDHHC12和YAP1蛋白水平.结果:TCGA数据库及GTEx数据库分析结果显示,ZDHHC12在GBM中的表达量明显高于正常脑组织(P<0.01),GBM细胞系中ZDHHC12的mRNA表达及蛋白水平高于NHA细胞系.U87和U251两组GBM细胞系中ZDHHC12的敲低会引起YAP1蛋白水平的降低.Co-IP实验验证了ZDHHC12及YAP1蛋白的相互关系.敲低ZDHHC12的表达能够显著抑制GBM细胞的增殖和迁移能力,差异有统计学意义(P<0.05).ZDHHC12的敲低也可以引起EMT相关标志物的改变.YAP1的回复可以逆转敲低ZDHHC12所引起的GBM肿瘤特性变化.TCGA数据库中,ZDHHC12的表达也与GBM患者的预后密切相关.在组织中ZDHHC12的表达也与YAP1表达呈高度正相关.结论:ZDHHC12在GBM中高表达且与YAP1呈正相关,ZDHHC12/YAP1轴可以调控GBM相关肿瘤特性.

胶质母细胞瘤;锌指DHHC结构域蛋白12;Yes相关蛋白1;上皮-间质转化

张起翔;尤永平

南京医科大学第一附属医院神经外科,江苏 南京 210029

中国癌症杂志

[1]张起翔;尤永平-.ZDHHC12在胶质母细胞瘤中通过YAP1调控肿瘤特性)[J].中国癌症杂志,2022(06):527-534

ZDHHC12,ZDHHC,RTFQ

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