典型文献
siRNA干扰对鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF57基因表达的影响
文献摘要：
研究通过在异育银鲫脊髓细胞系(Spinal cord tissue cell lines of Carassius auratus gibelio,CSC)中对鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)ORF57进行RNA干扰,以探究其对CyHV-2病毒复制的影响.首先,以FAM标记的异育银鲫β-actin的siRNA进行CSC细胞转染条件的优化,再将针对CyHV-2 ORF57基因设计的3条siRNA,转染CSC细胞,并进行病毒感染,评估siRNA对病毒复制和致细胞病变的影响.转染条件优化结果显示,在siRNA浓度为80 nmol/L,转染液维持24h后更换维持液,β-actin基因表达量最低且观察到的荧光点数量最多.而ORF57-siRNAs干扰结果显示,ORF57-siRNA-2组表现出了较强的抑制效果,在接毒48h时,ORF57-siRNA-2处理组的ORF57基因表达量降到相对于Mock组的33.55％(P<0.01),并且各ORF57-siRNA组都表现出了延缓CyHV-2致细胞病变的时间和强度,抑制时间可达120h.TCID50结果显示,不同组的ORF57-siRNAs均能降低病毒滴度,其中ORF57-siRNA-2将病毒原液TCID50108.487/mL下降至106.776/mL.研究结果表明,干扰ORF57的表达可大大降低CyHV-2的致细胞病变力和复制率,ORF57在CyHV-2复制与致细胞病变中起重要作用.本研究为CyHV-2基于siRNA技术的抗病毒治疗和弱毒株的改造提供了借鉴.
文献关键词：
鲤疱疹病毒Ⅱ型;RNA干扰;ORF57;小干扰RNA;异育银鲫脊髓细胞系;TCID50
中图分类号：
作者姓名：
金李萍;潘晓艺;蔺凌云;姚嘉赟;曹铮;尹文林;赖迎迢;陶家发;刘忆瀚;沈锦玉
作者机构：
上海海洋大学水产与生命学院, 上海 201200;浙江省淡水水产研究所, 农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室,浙江省鱼类健康与营养重点实验室, 湖州 313001;中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业农村部渔用药物创制重点实验室, 广州 510380
文献出处：
引用格式：
[1]金李萍;潘晓艺;蔺凌云;姚嘉赟;曹铮;尹文林;赖迎迢;陶家发;刘忆瀚;沈锦玉-.siRNA干扰对鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF57基因表达的影响)[J].水生生物学报,2022(04):537-544
A类：
ORF57,异育银鲫脊髓细胞系,TCID50108
B类：
疱疹病毒,Spinal,cord,tissue,cell,lines,Carassius,auratus,gibelio,CSC,Cyprinid,herpesvirus,CyHV,病毒复制,FAM,actin,细胞转染,致细胞病变,条件优化,nmol,染液,24h,基因表达量,光点,siRNAs,抑制效果,48h,Mock,120h,病毒滴度,原液,大大降低,抗病毒治疗,毒株,小干扰
AB值：
0.253038
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