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草鱼呼肠孤病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备与应用
文献摘要：
草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是导致该病的主要病原,研究将Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒GCRV-873株的外衣壳蛋白VP7基因进行原核表达,获得高度纯化VP7重组蛋白,通过免疫BALB/c小鼠,首次制备筛选得到高效价单克隆抗体.结果显示,GCRV-Ⅰvp7基因可在原核表达系统中高效表达,主要以包涵体形式存在,大小约为40 kD.免疫小鼠后筛选到了5株IgG类型阳性杂交瘤细胞株,其中3株亚型为IgG1,2株亚型为IgG2a.Western Blot实验和直接免疫荧光实验显示,该抗体可特异识别GCRV-873,并且ELISA检测原核重组蛋白的效价高达204800,亲和常数为4.04×109.研究制备的VP7蛋白单克隆抗体,为GCRV-Ⅰ病毒诊断技术开发及病毒感染机制的深入研究提供实验基础.
文献关键词：
GCRV;VP7;原核表达;单克隆抗体;Western Blot;免疫荧光;草鱼
中图分类号：
作者姓名：
季宁;魏伟;郭家鸿;王俊亚;李耀国;肖调义;邹钧
作者机构：
上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;湖南农业大学,湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心,长沙410128
文献出处：
引用格式：
[1]季宁;魏伟;郭家鸿;王俊亚;李耀国;肖调义;邹钧-.草鱼呼肠孤病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备与应用)[J].水生生物学报,2022(09):1293-1300
A类：
vp7
B类：
草鱼呼肠孤病毒,VP7,单克隆抗体的制备,制备与应用,Grass,carp,reovirus,GCRV,主要病原,外衣,衣壳蛋白,原核表达,重组蛋白,BALB,选得,效价,价单,表达系统,高效表达,包涵体,kD,杂交瘤细胞株,IgG1,IgG2a,Blot,免疫荧光,价高,亲和常数,诊断技术,技术开发,感染机制
AB值：
0.304991
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