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重组牛肠激酶轻链的制备工艺考察
文献摘要：
在重组多肽及蛋白质药物的制备过程中,牛肠激酶轻链是应用最广泛的工具酶之一.然而,较低的表达量导致其生产成本居高不下.本研究在已筛选得到的表达量较高的重组菌基础上,利用高密度发酵技术,获得胞外分泌表达的牛肠激酶轻链.并对工程菌的高密度发酵工艺进行了优化,目的蛋白的表达产量达到(478.47±1.70)mg/L.发酵液经过离心、微滤、超滤、离子交换柱色谱等分离提取步骤,使目的蛋白纯度达到(97.94±0.42)％.最后考察了重组牛肠激酶轻链的酶学性质.本研究打通了重组牛肠激酶轻链的小试制备工艺路线,为其作为工具酶在多肽药物生产领域的应用打下了良好的基础.
文献关键词：
牛肠激酶轻链;重组;表达;高密度发酵;分离纯化
中图分类号：
作者姓名：
魏笑;王丹丹;路建光;吴勇;化浩举;冯军
作者机构：
浙江工业大学长三角绿色制药协同创新中心,浙江杭州310014;中国医药工业研究总院,上海201203;上海多米瑞生物技术有限公司,上海201203
文献出处：
引用格式：
[1]魏笑;王丹丹;路建光;吴勇;化浩举;冯军-.重组牛肠激酶轻链的制备工艺考察)[J].中国医药工业杂志,2022(07):986-991,1026
A类：
牛肠激酶轻链
B类：
制备工艺,工艺考察,蛋白质药物,制备过程,工具酶,居高不下,选得,发酵技术,胞外分泌,分泌表达,工程菌,高密度发酵工艺,目的蛋白,达产,发酵液,微滤,超滤,离子交换,分离提取,蛋白纯度,酶学性质,通了,小试,试制,工艺路线,多肽药物,生产领域,分离纯化
AB值：
0.318848
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