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双元调控系统LisRK对单增李斯特菌抗酸应激与侵袭力作用的研究
文献摘要：
[目的]试验旨在阐明双元调控系统LisRK在单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)抵抗不利环境应激以及感染过程中的作用.[方法]以参考菌株10403S为亲本株,利用穿梭质粒pKSV7通过同源重组方法构建lisRK基因缺失株,并基于表达质粒pIMK2构建了lisRK回补株;比较了亲本株10403S、缺失株ΔlisRK与回补株CΔlisRK在酸(pH 4.5)、渗透压(5％ NaCl)和氧化(10 mmol/L H2O2)应激条件下的生长与存活能力及其对胃腺癌细胞M GC 803和肠上皮细胞Caco-2的侵袭率,进一步比较了亲本株10403S、缺失株ΔlisRK与回补株CΔlisRK经腹腔注射感染的小鼠肝脏和脾脏中的细菌载量.[结果]应激试验结果显示,lisRK基因缺失显著降低单增李斯特菌在酸应激(pH 4.5)条件下的生长能力,但不影响该菌在5％NaCl和10 mmol/L H2O2中的生长能力;缺失株ΔlisRK在强酸应激条件下(pH 2.5)的存活率(0.57％)极显著低于亲本株(2.07％)与回补株(1.97％)(P＜0.01).细胞侵袭试验显示,缺失株ΔlisRK对肠上皮细胞Caco-2和胃腺癌细胞MGC803的侵袭率分别为2.04％和0.13,极显著或显著低于亲本株与回补株(P＜0.01;P＜0.05).小鼠感染试验显示,在感染后48 h,缺失株ΔlisRK在小鼠肝脏和脾脏中的细菌载量分别为7.42×107和1.87×107 CFU,均低于亲本株和回补株感染小鼠肝脏和脾脏中的细菌载量,但并无显著性差异(P＞0.05).[结论]双元调控系统LisRK缺失减弱单增李斯特菌的抗酸应激能力和对宿主细胞的侵袭能力.
文献关键词：
单增李斯特菌;双元调控系统;抗酸应激;侵袭力
中图分类号：
作者姓名：
陈凌波;张钰;方小伟;吉俊芝;方春;杨玉莹
作者机构：
长江大学动物科学学院,荆州434025
文献出处：
引用格式：
[1]陈凌波;张钰;方小伟;吉俊芝;方春;杨玉莹-.双元调控系统LisRK对单增李斯特菌抗酸应激与侵袭力作用的研究)[J].中国畜牧兽医,2022(02):416-423
A类：
LisRK,抗酸应激,pKSV7,lisRK,pIMK2
B类：
双元调控系统,单增李斯特菌,侵袭力,Listeria,monocytogenes,环境应激,参考菌株,10403S,亲本株,穿梭,质粒,同源重组,组方,基因缺失株,渗透压,NaCl,H2O2,胃腺癌,癌细胞,肠上皮细胞,Caco,经腹腔,腹腔注射,小鼠肝脏,脾脏,细菌载量,强酸,细胞侵袭,和胃,MGC803,小鼠感染试验,CFU,宿主,主细胞,侵袭能力
AB值：
0.195231
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