[目的]探究葛根素是否通过AMPK通路促进松辽黑猪前体脂肪细胞分化,以期为在饲粮中添加葛根素改善猪肉肉质提供参考.[方法]待松辽黑猪前体脂肪细胞汇合度达90％时进行为期4 d的诱导分化.诱导分化时,将细胞分为对照组(Con)、葛根素组(Pue)、葛根素+AMPK激活剂AICAR组(AICAR)及葛根素+AMPK抑制剂CompoundC组(CompoundC),对照组诱导液中不添加葛根素,Pue组添加40 μmol/L葛根素,AICAR组添加40 μmol/L葛根素+500 μmol/L AICAR,CompoundC 组添加 40 μmol/L 葛根素+20 μmol/L CompoundC.诱导分化结束,收集各组细胞,用甘油三酯(TG)酶法检测细胞中甘油三酯浓度;实时荧光定量PCR检测AMPK各亚基以及成脂分化相关基因的表达水平;用Western blotting检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、AM P依赖的蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK(Thr-172)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的蛋白表达水平;通过Autodock Vina 1.20对葛根素、AMPKα亚基做分子对接预测.[结果]甘油三酯测定结果显示,与Con组相比,Pue组甘油三酯浓度显著增加(P＜0.05);与Pue组相比,AICAR组甘油三酯浓度显著降低(P＜0.05).实时荧光定量PCR结果显示,与Con 组相比,Pue 组 PPKAG2、PPKAB1、PPKAB2、PPKAA1、PGC-1α 表达量均显著降低(P＜0.05),Pue 组C/EBPα、PPARγ、ACC 表达量均显著增加(P＜0.05);与 Pue 组相比,AICAR 组 PPKAG1、PPKAG2、PPKAB1、PPKAB2、PPKAA1表达量显著增加(P＜0.05),AICAR组C/EBPα、PPARγ、ACC表达量均显著降低(P＜0.05),CompoundC 组 PPKAG1、PPKAG2、PPKAB2 表达量均显著降低(P＜0.05),CompoundC 组 C/EBPα、ACC 表达量均显著增加(P＜0.05).Western blotting结果显示,与Con组相比,Pue组PPARγ、ACC蛋白表达量显著增加(P＜0.05),AMPK、p-AMPK蛋白表达量显著下降(P＜0.05),且p-AMPK/AMPK显著下降(P＜0.05);与Pue组相比,AICAR组PPARγ、ACC蛋白表达量显著下降(P＜0.05),AMPK、p-AMPK蛋白表达量显著增加(P＜0.05),CompoundC 组 PPARγ、ACC 蛋白表达量显著增加(P＜0.05),AMPK、p-AMPK 蛋白表达量及 p-AMPK/AMPK显著下降(P＜0.05).[结论]40 μmol/L葛根素能够显著增加脂肪细胞中甘油三酯含量,显著上调成脂分化基因PPARγ、C/EBPα、ACC的表达量,显著下调AMPK各亚基的表达量,AMPK激活剂AIRCR可显著抑制葛根素的作用,说明葛根素可通过抑制AMPK通路调节松辽黑猪前体脂肪细胞成脂分化.

葛根素;松辽黑猪;AMPK通路;成脂分化;脂肪细胞

吕香州;张琪;李欣;于永生

吉林省农业科学院动物生物技术研究所,公主岭136100

中国畜牧兽医

[1]吕香州;张琪;李欣;于永生-.基于AMPK通路研究葛根素对猪前体脂肪细胞成脂分化的影响)[J].中国畜牧兽医,2022(06):2088-2097

CompoundC,PPKAG2,PPKAB1,PPKAB2,PPKAA1,PPKAG1,AIRCR

葛根素,猪前体脂肪细胞,成脂分化,松辽黑猪,脂肪细胞分化,饲粮,猪肉,肉质,汇合,诱导分化,分化时,Con,Pue,+AMPK,激活剂,AICAR,+500,+20,甘油三酯,酶法检测,亚基,blotting,过氧化物酶体增殖物激活受体,PPAR,蛋白激酶,Thr,辅酶,羧化酶,ACC,蛋白表达水平,Autodock,Vina,分子对接,测定结果,PGC,EBP,加脂,调成

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