典型文献
一种快速检测乙型脑炎病毒滴度的荧光灶试验方法的建立、验证及应用
文献摘要：
目的:建立快速荧光灶试验(fluorescence focus assay，FFA)滴定乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)的方法，验证该法替代病毒蚀斑法测定乙型脑炎减毒活疫苗(简称乙脑减毒活疫苗)滴度的可行性并将该法作初步应用。方法:利用原核表达方式构建JEV非结构蛋白1(non-structural protein 1，NS1)重组体系，以纯化所得的JEV-NS1蛋白免疫家兔制备抗NS1蛋白多克隆抗体，建立快速FFA测定JEV滴度的方法。通过与病毒蚀斑法作比对分析，对其专属性、准确度、精密度、线性、范围和耐用性进行验证。用经验证后的FFA检测28批乙脑减毒活疫苗，分析其应用于生产的可行性。结果:所制备的多克隆抗体与JEV可产生特异性荧光灶反应，与其他病毒(森林脑炎病毒、黄热病毒、人柯萨奇病毒A2型和A4型)无交叉反应；FFA方法学验证结果均符合乙脑减毒活疫苗的质控要求；与蚀斑法比较，FFA检测结果更趋一致。结论:本研究建立的FFA通过方法学验证，可应用于乙脑减毒活疫苗成品的滴度测定。
文献关键词：
乙型脑炎减毒活疫苗;多克隆抗体;荧光抗体技术;病毒蚀斑法;验证
中图分类号：
作者姓名：
罗娜;乔建;姜志军;杨禅堂;张仲锴;吴杰;徐葛林
作者机构：
武汉生物制品研究所有限责任公司轮状病毒疫苗室，武汉 430207
文献出处：
引用格式：
[1]罗娜;乔建;姜志军;杨禅堂;张仲锴;吴杰;徐葛林-.一种快速检测乙型脑炎病毒滴度的荧光灶试验方法的建立、验证及应用)[J].中华微生物学和免疫学杂志,2022(03):224-233
A类：
替代病毒,病毒蚀斑法
B类：
快速检测,乙型脑炎病毒,病毒滴度,快速荧光,fluorescence,focus,assay,FFA,滴定,Japanese,encephalitis,virus,JEV,乙型脑炎减毒活疫苗,乙脑减毒活疫苗,初步应用,原核表达,表达方式,非结构蛋白,structural,protein,NS1,重组体,家兔,多克隆抗体,比对分析,专属性,精密度,耐用性,森林脑炎病毒,黄热病毒,柯萨奇病毒,A2,A4,交叉反应,方法学验证,质控,更趋,荧光抗体技术
AB值：
0.273219
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