目的:探究消皮素D(GSDMD)在胶质瘤发生发展过程中的意义和体外实验中对胶质瘤细胞系增殖、迁移的影响及其分子机制。方法:利用生物信息学的方法分析胶质瘤中GSDMD基因的表达特点，及GSDMD表达水平高低同临床预后的关系。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测人胶质瘤细胞U251MG、U87MG、LN229及正常胶质细胞HMC3中GSDMD的表达；运用慢病毒GSDMD基因敲除载体(LV-shGSDMD)与慢病毒空载对照(LV-NC)转染胶质瘤细胞LN229，并筛选稳转株LN229-NC和LN229-shGSDMD；应用qRT-PCR检测GSDMD mRNA的表达水平；细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测LN229-NC、LN229-shGSDMD细胞的增殖能力；采用Transwell检测LN229-NC、LN229-shGSDMD细胞的迁移能力；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测LN229-NC、LN229-shGSDMD细胞GSDMD、Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-1、白细胞介素(IL)-1β蛋白的表达情况，两组间的比较采用双尾Student t检验。 结果:在癌症基因组图谱(TCGA)数据库及基因组织表达(GTEx)数据库中，胶质瘤组GSDMD基因表达水平高于对照组中的正常组织(3.62±0.04比2.83±0.01， t＝24.44， P<0.05)，胶质瘤中GSDMD高表达组中位生存时间短于低表达组[2.1年比7.9年，风险比( HR)＝4.5， P<0.05]；胶质瘤中GSDMD、IL-1β、Caspase-1表达水平高于正常组织，且随胶质瘤等级升高而上升。胶质瘤中NLRP3的表达水平同样显著高于正常组织，但同胶质瘤的等级没有明显关联。在细胞实验中，GSDMDmRNA在胶质瘤细胞系U251MG、U87MG、LN229中的表达量显著高于正常胶质细胞HMC3(4.04±0.35、4.76±0.21、6.29±0.28比1.00±0.07， P<0.05)，而LN229高于其他胶质瘤细胞系( F＝200.2， P<0.05)；基因敲除后，LN229-shGSDMD组较LN229-NC组细胞中GSDMD mRNA的表达量下降(0.15±0.04比1.00±0.01， t＝14.32， P< 0.05)；CCK-8实验中，LN229-shGSDMD组细胞吸光度( A)值曲线在LN229-NC组细胞下方，增殖活性下降( t＝4.580， P<0.05)；迁移实验中LN229-NC组细胞迁移效率显著高于LN229-shGSDMD组细胞(393.8±11.61比187.0±6.20， t＝50.25， P<0.05)。与LN229--NC组比较，LN229-shGSDMD组细胞中的蛋白表达水平NLRP3下调(0.923±0.003比0.671±0.004， t＝579.72， P<0.05)、Caspse-1下调(1.221±0.005比0.498±0.001， t＝180.61， P<0.05)、IL-1β下调(1.221±0.005比0.498±0.001， t＝180.64， P<0.05)，与生信分析结果及表型一致。 结论:GSDMD过表达促进胶质瘤细胞的增殖、迁移，其机制可能同焦亡途径有关。

胶质瘤;增殖;迁移;焦亡

蒲亚陆;周文科;梁文;李富光;王涛;时志超;杨如

新乡医学院第一附属医院神经外科，卫辉　453100;新乡医学院第一附属医院生命科学研究中心，卫辉　453100

中华实验外科杂志

[1]蒲亚陆;周文科;梁文;李富光;王涛;时志超;杨如-.消皮素D基因高表达同胶质瘤不良预后相关)[J].中华实验外科杂志,2022(06):1161-1164

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