目的:通过研究不同的玻璃液对人卵巢组织冻存后的近期异种移植效果，以筛选出较优的玻璃化冷冻方案。方法:收集2018年3月至2019年12月期间在北京大学深圳医院因妇科疾病行手术治疗的4例患者卵巢组织，将卵巢组织分割成5~10 mm×10 mm×1 mm的小块，分为新鲜对照组和4个处理组，4个处理组分别放入G1、G2、G3、G4不同的玻璃液中，经过4组玻璃液预平衡和平衡后冻存4周后复苏，复苏后的组织移植到胚龄10 ｄ的鸡卵绒毛尿囊膜（chorioallantoic membrane，CAM）上培养，培养5 d后取出移植于CAM的卵巢组织，HE染色比较移植后4组卵巢组织的正常原始卵泡率，免疫组织化学法检测CD105标记的4组卵巢组织的新生血管并比较其微血管密度；Western blotting法检测并比较4组卵巢组织Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:经过G1、G2、G3、G4玻璃液冻融并移植于鸡胚5 d后的卵巢组织，正常原始卵泡率分别为63.2%（24/38）、68.3%（28/41）、61.9%（26/42）、69.6%（32/46），新鲜对照组的正常卵泡率为82.8%（82/99），5组间的差异有统计学意义（ P=0.044），进一步两两比较，各处理组间正常原始卵泡率均低于新鲜对照组（均 P<0.05），而各处理组间的正常卵泡率差异无统计学意义（ P>0.05）。G1组、G2组、G3组和G4组鸡胚移植后的卵巢组织均可见CD105表达量增加，CD105标记的微血管密度（microvascular density，MVD）在新鲜对照组和G1组、G2组、G3组、G4组分别为6.51±1.30/mm 2、11.10±1.62/mm 2、13.04±1.84/mm 2、9.11±1.09/mm 2、11.28±1.62/mm 2，各处理组的MVD均高于新鲜对照组，差异有统计学意义（ P<0.001， P<0.001， P=0.022， P<0.001），G1组、G2组和G4组的MVD均高于G3组（ P=0.024， P<0.001， P=0.034）。Western blotting检测结果显示G1组、G2组、G3组、G4组和新鲜对照组的Bcl-2/Bax的比值分别为0.71±0.37、0.84±0.29、0.45±0.18、0.84±0.29和0.44±0.21，差异有统计学意义（ P=0.013），G2组Bcl-2/Bax的比值明显高于新鲜对照组和G3组（ P=0.025， P=0.038）。 结论:玻璃化冷冻保存的人卵巢组织，在移植早期原始卵泡丢失较多。经过G2和G4玻璃液冷冻复融后的人卵巢组织，在移植5 d后血管化程度较高，抗凋亡能力强，是适用于人卵巢组织冷冻的较优的玻璃化冷冻方案。

卵巢组织;玻璃化冷冻;凋亡;微血管密度

李晓虹;汤惠茹;李雨珊;曾玉翠;魏蔚霞;黄斌;杜辉;吴瑞芳

北京大学深圳医院，深圳　518036;深圳市女性重大疾病早期诊断技术重点实验室，深圳　518036

中华生殖与避孕杂志

[1]李晓虹;汤惠茹;李雨珊;曾玉翠;魏蔚霞;黄斌;杜辉;吴瑞芳-.不同玻璃液冻存人卵巢组织的近期异种移植效果的比较)[J].中华生殖与避孕杂志,2022(01):58-64

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