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淡豆豉炮制中黄曲霉毒素产毒株的筛选鉴定和产毒能力测定
文献摘要:
目的 对淡豆豉炮制过程中产黄曲霉毒素(aflatoxins,AFTs)的微生物(简称产毒菌)进行筛选鉴定、定量分析和产毒能力测定.方法 运用紫外荧光法初筛淡豆豉炮制中各样本的产毒菌并菌落计数;对初筛菌株的18S rDNA序列进行PCR扩增、测序,测序结果经NCBI同源性比对、MEGA7.0软件构建系统发育树进行分子生物学鉴定;应用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测各产毒菌培养液中AFTs含量,确定各产毒菌的产毒能力.结果 紫外荧光法结合分子生物学共筛选鉴定出15株产毒菌株,为黄曲霉和溜曲霉;"黄衣上遍"阶段产毒菌菌落数逐渐增多,至发酵第6天时最多,为1X106.30CFU/g,进入"再闷"阶段产毒菌数量逐渐减少,从再闷第9天开始至第15天均未检测到产毒菌;经UPLC-MS/MS法确定15株菌中有5株不产毒,10株产毒,且产毒能力各不相同并均低于5 ng/mL,远低于黄曲霉标准株(654.90 ng/mL).结论 淡豆豉炮制过程中存在产AFTs能力不同的黄曲霉、溜曲霉且产毒菌数量呈现先升后降,将为探讨淡豆豉炮制中AFTs消长机制奠定基础,并首次从安全性角度证实了淡豆豉"再闷"的重要性和"再闷"时间的合理性.
文献关键词:
淡豆豉;炮制过程;黄曲霉毒素;产毒能力;超高效液相色谱-串联质谱技术;黄曲霉;溜曲霉
中图分类号:
作者姓名:
李春玲;贺婧;王立元;李翠英;龙凯;翁美芝;冯驰;谢小梅
作者机构:
江西中医药大学,江西南昌 330004;广州医科大学附属第六医院泌尿外科,广东清远 511500;南昌大学转化医学研究院,江西南昌 330031;江西中医药大学附属医院,江西南昌 330006
文献出处:
引用格式:
[1]李春玲;贺婧;王立元;李翠英;龙凯;翁美芝;冯驰;谢小梅-.淡豆豉炮制中黄曲霉毒素产毒株的筛选鉴定和产毒能力测定)[J].中草药,2022(05):1411-1417
A类:
溜曲霉,1X106,30CFU
B类:
淡豆豉,中黄,黄曲霉毒素,毒株,筛选鉴定,产毒能力,炮制过程,aflatoxins,AFTs,毒菌,紫外荧光法,初筛,菌落计数,筛菌,18S,rDNA,NCBI,同源性,MEGA7,软件构建,建系,系统发育树,分子生物学鉴定,超高效液相色谱,串联质谱法,ultra,performance,liquid,chromatography,tandem,mass,spectrometry,UPLC,培养液,株产,黄衣,菌落数,天时,天开,未检,各不相同,标准株,消长,长机,串联质谱技术
AB值:
0.259382
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