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长链非编码RNA LINC01133通过调控线粒体功能影响人牙周膜干细胞成牙骨质分化潜能的研究
文献摘要：
目的:探索长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）LINC01133对人牙周膜干细胞（human periodontal ligament stem cells，hPDLSC）成牙骨质分化潜能的影响及其作用机制。方法:收集2021年9月至2022年1月第四军医大学口腔医学院口腔颌面外科17~30岁10例就诊患者因正畸需要或因阻生拔除的牙齿共12颗，从离体牙上提取hPDLSC，分别转染靶向LINC01133小干扰RNA（small interfering RNA-LINC01133，si-LINC01133）或阴性对照小干扰RNA（small interfering RNA-negative control，si-NC），以转染si-LINC01133为实验组，转染si-NC为阴性对照组。利用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，RT-qPCR）检测si-LINC01133的沉默效率；通过蛋白质印迹法检测hPDLSC成牙骨质分化相关蛋白包括骨涎蛋白（bone sialoprotein，BSP）、牙骨质附着蛋白（cementum attachment protein，CAP）、牙骨质蛋白1（cementum protein-1，CEMP-1）的表达；利用流式细胞术和线粒体超氧化物指示剂MitoSOX检测细胞线粒体活性氧产量；通过JC-1荧光染色法检测线粒体膜电位水平；利用蛋白质印迹法检测线粒体呼吸链复合体蛋白包括NADH脱氢酶［泛醌］1β亚单位8（NADH dehydrogenase［ubiquinone］1 beta subcomplex subunit 8，NDUFB8）、琥珀酸脱氢酶亚单位A（succinate dehydrogenase complex flavoprotein subunit A，SDHA）、泛醌-细胞色素c还原酶核心蛋白1（ubiquinol-cytochrome c reductase core protein 1，UQCR1）、细胞色素c氧化酶亚单位4亚型1（cytochrome c oxidase subunit 4 isoform 1，COXⅣ）、ATP合成酶F1亚单位α（ATP synthase F1 subunit alpha，ATP5A）的表达水平。结果:hPDLSC的LINC01133表达水平被si-LINC01133有效沉默（阴性对照组：1.000±0.000，实验组：0.385±0.128）（
t=10.72，
P<0.01），沉默效率超过60%。LINC01133沉默后，hPDLSC BSP表达水平显著下降（阴性对照组：1.000±0.000，实验组：0.664±0.179）（
t=4.62，
P<0.01）；CAP表达水平显著下降（阴性对照组：1.000±0.000，实验组：0.736±0.229）（
t=2.83，
P<0.05）。LINC01133沉默后，hPDLSC线粒体活性氧产量显著上升（阴性对照组：1.000±0.000，实验组：1.458±0.185）
（t=4.96，
P<0.05）；线粒体膜电位水平显著下降（阴性对照组：1.000±0.000，实验组：0.209±0.029）（
t=53.99，
P<0.01）；NDUFB8表达水平显著上升（阴性对照组：1.000±0.000，实验组：1.683±0.397）（
t=3.45，
P<0.05）；SDHA表达水平显著下降（阴性对照组：1.000±0.000，实验组：0.428±0.228）（
t=5.02，
P<0.05）。实验组UQCR1、COXⅣ和ATP5A的表达水平与阴性对照组相比差异均无统计学意义（
P>0.05）。
结论:LINC01133可能通过调控hPDLSC线粒体功能，进而影响hPDLSC成牙骨质分化潜能。
文献关键词：
牙周炎;细胞分化;成牙骨质分化;长链非编码RNA;牙周膜干细胞;线粒体功能
中图分类号：
作者姓名：
邓道坤;李璇;贺小涛;孙海花;田蓓敏;陈发明
作者机构：
第四军医大学口腔医学院牙周病科 军事口腔医学国家重点实验室 国家口腔疾病临床医学研究中心 陕西省口腔生物工程技术研究中心，西安 710032;第四军医大学口腔医学院急诊与综合临床科 军事口腔医学国家重点实验室 国家口腔疾病临床医学研究中心 陕西省口腔疾病国际联合研究中心，西安 710032
文献出处：
引用格式：
[1]邓道坤;李璇;贺小涛;孙海花;田蓓敏;陈发明-.长链非编码RNA LINC01133通过调控线粒体功能影响人牙周膜干细胞成牙骨质分化潜能的研究)[J].中华口腔医学杂志,2022(12):1209-1216
A类：
LINC01133,成牙骨质分化,hPDLSC,cementum,CEMP,subcomplex,ubiquinol,UQCR1
B类：
长链非编码,线粒体功能,功能影响,人牙周膜干细胞,分化潜能,long,coding,lncRNA,human,periodontal,ligament,stem,cells,第四军医大学,口腔医学,口腔颌面外科,正畸,阻生,拔除,牙齿,离体牙,转染,小干扰,small,interfering,negative,control,real,quantitative,qPCR,蛋白质印迹法,白包,bone,sialoprotein,BSP,attachment,CAP,流式细胞术,指示剂,MitoSOX,线粒体活性氧,JC,荧光染色法,检测线,线粒体膜电位,线粒体呼吸链,复合体,NADH,泛醌,亚单位,dehydrogenase,ubiquinone,beta,subunit,NDUFB8,琥珀酸脱氢酶,succinate,flavoprotein,SDHA,细胞色素,还原酶,核心蛋白,cytochrome,reductase,core,oxidase,isoform,COX,合成酶,synthase,alpha,ATP5A,牙周炎,细胞分化
AB值：
0.251169
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