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假丝酵母氨基甲酸乙酯水解酶的分子克隆及酶学性质
文献摘要：
氨基甲酸乙酯是存在于发酵食品中的一种潜在致癌物.生物酶法可有效降解氨基甲酸乙酯.该研究从假丝酵母CCTCC AY 2017001基因组中克隆了氨基甲酸乙酯水解酶基因cpUH,并实现了其在Escherichia coli中的高效表达.实验结果表明,cpUH基因大小为1656 bp,编码552个氨基酸;重组蛋白大小约为60 kDa,纯化后比酶活力为3.10 U/mg;cpUH的最适反应温度和pH分别为40℃和7.5,其在25～30℃和pH 6.0～9.0均有较好的稳定性;金属离子Cu2+、Zn2+明显抑制酶活力,其余Fe3+、Mn2+、Ca2+、Co2+、Mg2+都对酶活力有抑制作用,而EDTA对酶活力无影响;此外,以氨基甲酸乙酯为底物时,其Km和Vmax值分别为6.01 mmol/L和3.34μmol/min,且cpUH对乙醇具有一定的耐受性,有望应用到酒饮料生产中.
文献关键词：
假丝酵母;氨基甲酸乙酯;氨基甲酸乙酯水解酶;异源表达;酶学性质
中图分类号：
作者姓名：
张献;冯治平;张耀;张雪怡;杨丽娟
作者机构：
四川轻化工大学 生物工程学院,四川 宜宾,644000;酿酒生物技术及应用四川省重点实验室(四川轻化工大学),四川 宜宾,644000
文献出处：
引用格式：
[1]张献;冯治平;张耀;张雪怡;杨丽娟-.假丝酵母氨基甲酸乙酯水解酶的分子克隆及酶学性质)[J].食品与发酵工业,2022(03):56-62
A类：
cpUH
B类：
假丝酵母,氨基甲酸乙酯水解酶,分子克隆,酶学性质,发酵食品,致癌物,生物酶法,CCTCC,AY,酶基因,Escherichia,coli,高效表达,bp,重组蛋白,kDa,比酶活,酶活力,反应温度,金属离子,Cu2+,Zn2+,Fe3+,Mn2+,Ca2+,Co2+,Mg2+,EDTA,底物,Km,Vmax,耐受性,饮料,异源表达
AB值：
0.302571
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