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猪圆环病毒3型PCR-ELISA检测方法的研究与应用
文献摘要：
为建立一种检测猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)的PCR-ELSIA方法,根据GenBank上报道的PCV3全基因组序列,针对其高度保守区域设计1对特异性引物,上、下游引物的5'端分别标记生物素和地高辛.经PCR扩增获得大量带有标记的目的基因,依靠生物素-链霉亲和素的非共价结合作用固定目的基因于载体上,再通过羊抗DIG-HRP的显色反应,建立PCR-ELISA检测方法.结果表明,该方法与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型无交叉反应,特异性良好.PCR-ELISA方法最低检测限为5.58×102 copies/μL,敏感性比常规PCR高100倍(常规PCR的检测限为5.58×104 copies/μL).PCR-ELISA方法批内和批间重复性检测的变异系数分别为1.90％～5.20％和3.89％～9.03％.对132份临床样品进行PCV3检测,PCR-ELSIA检出率为9.10％(12/132),高于常规PCR的检出率(4.55％,6/132).综上,该方法具有特异、灵敏、安全高效的优点,可为PCV3的诊断、防控和流行病学调查提供新的技术手段.
文献关键词：
PCV3;PCV2;PCR-ELISA
中图分类号：
作者姓名：
李鹏;孙延举;雷梦瑶;孙国鹏;银梅;苏为为;王选年;刘兴友;王利平
作者机构：
新乡学院生命科学与基础医学学院,河南新乡453003;河南科技学院动物科技学院,河南新乡453003
文献出处：
引用格式：
[1]李鹏;孙延举;雷梦瑶;孙国鹏;银梅;苏为为;王选年;刘兴友;王利平-.猪圆环病毒3型PCR-ELISA检测方法的研究与应用)[J].中国兽医学报,2022(11):2152-2157
A类：
B类：
猪圆环病毒,porcine,circovirus,type,PCV3,ELSIA,GenBank,上报,全基因组序列,区域设计,特异性引物,生物素,地高辛,目的基因,非共价,DIG,HRP,显色反应,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪瘟病毒,猪细小病毒,交叉反应,检测限,copies,重复性检测,安全高效,流行病学调查,PCV2
AB值：
0.327282
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