典型文献
靶向肠道M细胞的PEDV COE基因的蛋白表达与纯化
文献摘要:
为构建靶向肠道微折叠细胞(microfold cell,M细胞)的猪病毒性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)COE基因的原核表达载体并表达重组蛋白,用于后续将PEDV抗原靶向M细胞引发黏膜免疫应答来制备亚单位疫苗奠定基础.将M细胞靶向肽Col基因插入至PEDV COE基因的C端,设计引物扩增COE和COE-Col基因序列,并构建原核表达载体pET-32a(+)-COE和pET-32a(+)-COE-Col.将其转化到大肠杆菌TransB(DE3)中进行IPTG诱导和SDS-PAGE验证蛋白表达后,使用HisTrapTM FF Crude亲和层析柱纯化并浓缩.结果表明,成功克隆了 PEDV COE和插入靶向肽Col的COE-Col基因并分别构建了原核表达载体,转化TransB(DE3)诱导后表达成功,纯化后在约35 kDa(COE)和37 kDa(COE-Col)均得到单一的蛋白条带,复性浓缩后质量浓度提高,为后续利用M细胞激发的黏膜免疫治疗PEDV及其他疾病提供方向和奠定理论基础.
文献关键词:
猪流行性腹泻病毒;M细胞;靶向肽Col基因;COE基因
中图分类号:
作者姓名:
崔玉莹;戴继鸿;李村院;郭涛;李晓悦;姚瑞;胡瑞瑞;刘开平;米桃桃;倪伟;胡圣伟
作者机构:
石河子大学生命科学学院,新疆石河子832000;石河子大学动物科技学院,新疆石河子832000
文献出处:
引用格式:
[1]崔玉莹;戴继鸿;李村院;郭涛;李晓悦;姚瑞;胡瑞瑞;刘开平;米桃桃;倪伟;胡圣伟-.靶向肠道M细胞的PEDV COE基因的蛋白表达与纯化)[J].中国兽医学报,2022(06):1205-1212
A类:
microfold,HisTrapTM
B类:
PEDV,COE,折叠,cell,猪病毒性腹泻,病毒性腹泻病,porcine,epidemic,diarrhea,virus,原核表达载体,重组蛋白,黏膜免疫,免疫应答,亚单位疫苗,细胞靶向,靶向肽,Col,基因插入,引物,基因序列,pET,32a,大肠杆菌,TransB,DE3,IPTG,SDS,PAGE,FF,Crude,亲和层析,层析柱,kDa,白条,条带,后续利用,免疫治疗,猪流行性腹泻病毒
AB值:
0.300086
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