典型文献
一种来源于Phialophora attae的玉米赤霉烯酮内酯水解酶ZHD11F的酶学表征和结构特点
文献摘要：
玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)是一种雌激素类真菌毒素,可以与动物的雌激素受体竞争性结合,导致动物生殖系统内的激素紊乱.ZEN内酯水解酶(ZEN lactone hydrolase,ZHD)可以水解ZEN中的内酯键,进而使其转化为无雌激素毒性的产物.[目的]利用生物信息学分析以及酶学性质探索,鉴定出一个具有新特性的ZEN内酯水解酶.[方法]构建pET28a-zhdlif表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达ZHD11F,利用Ni-NTA纯化得到ZHD11F,对其酶学性质进行分析,并通过结构模拟和分子动力学分析阐明ZHD11F低温活性的机制.[结果]ZHD11F以ZEN为底物,比酶活为40.04 U/mg,最适反应温度与pH值分别为35℃和8.0,在pH 6.0-9.5的范围内具有超过60％的酶活力,在35℃以下具有较好的热稳定性,能够耐受多种金属离子.ZHD11F在10℃和20℃时,其活性分别保持20％和40％.更多的loop区增加了结构的柔韧性是该酶稳定性较差、在低温活性比较高的主要原因.[结论]Phialophora attae是瓶霉属的一种真菌,目前此真菌来源的酶极少被鉴定.关于本研究将Phialophora attae来源的ZEN内酯水解酶ZHD11F,在大肠杆菌中成功可溶性表达并得到纯酶,表征分析显示该酶是目前报道的第一个低温ZEN内酯水解酶,为研究此类酶的耐冷机制、广温度范围提供了候选,同时拓展了Phialophora attae来源酶的功能研究.
文献关键词：
玉米赤霉烯酮;ZEN内酯水解酶;低温活性;异源表达;酶学性质
中图分类号：
作者姓名：
林晓帆;张诺;王辉;王美星;蒋思婧;贺妮莎;张桂敏
作者机构：
湖北大学生命科学学院,湖北省生物资源绿色转化协同创新中心,省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室,湖北武汉430062;北京化工大学生命科学与技术学院,北京100029
文献出处：
引用格式：
[1]林晓帆;张诺;王辉;王美星;蒋思婧;贺妮莎;张桂敏-.一种来源于Phialophora attae的玉米赤霉烯酮内酯水解酶ZHD11F的酶学表征和结构特点)[J].微生物学报,2022(11):4202-4212
A类：
attae,ZHD11F,zhdlif
B类：
Phialophora,玉米赤霉烯酮,内酯,酯水解,水解酶,zearalenone,ZEN,雌激素类,真菌毒素,雌激素受体,竞争性,生殖系统,lactone,hydrolase,酯键,利用生物,生物信息学分析,酶学性质,新特性,pET28a,表达载体,大肠杆菌,BL21,DE3,诱导表达,NTA,结构模拟,分子动力学,动力学分析,低温活性,底物,比酶活,反应温度,酶活力,热稳定性,金属离子,loop,柔韧性,酶稳定性,前此,极少,可溶性表达,表征分析,耐冷,冷机,功能研究,异源表达
AB值：
0.288362
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
