典型文献
C端结构域截短提高苏云金芽孢杆菌来源几丁质酶的活力
文献摘要：
[目的]尝试利用蛋白质结构域工程的手段优化苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis BMB 171)来源的几丁质酶BtChiA的酶活力,并对水解胶体几丁质的产物进行定性和定量分析.[方法]根据BtChiA的序列分析其结构域的组成,构建BtChiA及部分结构域缺失的突变体蛋白在大肠杆菌中的表达菌株并进行蛋白的表达纯化;利用HPLC分析几丁质酶水解产物的类型及含量.[结果]异源表达纯化获得了纯度90％以上,大小正确的BtChiA(全长蛋白)和BtChiA△50(截短几丁质结合结构域CBD和纤连蛋白结构域FnⅢ).BtChiA△50水解胶体几丁质的活力是BtChiA的1.64倍.两者水解胶体几丁质的产物均为几丁单糖GlcNAc和几丁二糖(GlcNAc)2,全长蛋白BtChiA的水解产物中(GlcNAc)2的含量是GlcNAc的0.97倍,BtChiA△50水解产物中(GlcNAc)2的含量是GlcNAc的1.79倍.[结论]利用蛋白质结构域工程构建了水解活性提高的BtChiA△50突变体、优化了水解产物的组成.
文献关键词：
苏云金芽胞杆菌;几丁质酶;蛋白质结构域工程;酶活力
中图分类号：
作者姓名：
黎欣宇;邓旭;蒋思婧;周玉玲;欧阳玉茹;贺妮莎;张桂敏
作者机构：
湖北大学生命科学学院,湖北省生物资源绿色转化协同创新中心,省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室,湖北武汉430062
文献出处：
引用格式：
[1]黎欣宇;邓旭;蒋思婧;周玉玲;欧阳玉茹;贺妮莎;张桂敏-.C端结构域截短提高苏云金芽孢杆菌来源几丁质酶的活力)[J].微生物学报,2022(04):1379-1389
A类：
蛋白质结构域工程,BtChiA
B类：
苏云金芽孢杆菌,几丁质酶,苏云金芽胞杆菌,Bacillus,thuringiensis,BMB,酶活力,胶体几丁质,定性和定量分析,序列分析,突变体,大肠杆菌,表达纯化,HPLC,酶水解,水解产物,异源表达,全长,结合结构,CBD,纤连蛋白,蛋白结构域,Fn,单糖,GlcNAc,二糖,水解活性
AB值：
0.215318
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