典型文献
细胞色素P450还原酶与CYP17的共表达及其功能分析
文献摘要：
17α-羟基黄体酮(17α-OH-PROG)是甾体激素类药物的关键中间体,其生物合成主要由细胞色素单加氧酶(CYP17)催化生成.在此过程中,细胞色素P450还原酶(cytochrome P450 reductase,CPR)作为细胞色素P450酶电子传递链的重要组成部分,直接影响CYP17的催化效率.为研究不同来源CPR与17α-羟化酶的适配性,首先以人源17α-羟化酶作为研究对象,构建了表达质粒pPIC3.5k-hCYP17,获得了重组毕赤酵母菌株.其次筛选获得3种不同来源CPR,构建了表达质粒pPICZX-CPR,获得17α-羟化酶与CPR共表达菌株,并在毕赤酵母中进行转化实验,对转化产物进行薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)分析.结果显示,重组菌株具有17α-羟化酶活性,能够催化黄体酮生成目标产物17α-OH-PROG以及副产物16α-羟基黄体酮(16α-OH-PROG).不同来源的CPR与17α-羟化酶共表达与仅表达17α-羟化酶的产率相比均有所提高,其中hCPR-CYP17共表达菌株表现出最高的转化水平,17α-OH-PROG产率提高42％.上述结果表明:17α-羟化酶基因与CPR共表达能够提高其黄体酮17α-羟基化水平.为甾体黄体酮17α-羟基化的生物催化研究提供思路,对甾体药物的工业生产具有重要意义.
文献关键词：
毕赤酵母;黄体酮;17α-羟化酶;异源表达;细胞色素P450还原酶
中图分类号：
作者姓名：
吴琼;赵昕;杜玉瑶;毛淑红
作者机构：
工业发酵微生物教育部重点实验室 天津科技大学生物工程学院 天津 300457
文献出处：
引用格式：
[1]吴琼;赵昕;杜玉瑶;毛淑红-.细胞色素P450还原酶与CYP17的共表达及其功能分析)[J].中国生物工程杂志,2022(10):1-8
A类：
甾体激素类药物,pPIC3,hCYP17,pPICZX,hCPR
B类：
细胞色素,P450,还原酶,共表达,功能分析,黄体酮,PROG,关键中间体,生物合成,单加氧酶,化生成,cytochrome,reductase,电子传递,催化效率,不同来源,羟化酶,适配性,先以,质粒,5k,重组毕赤酵母菌株,化实验,转化产物,薄层色谱,TLC,HPLC,重组菌株,副产物,酶基因,羟基化,生物催化,异源表达
AB值：
0.221041
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
