典型文献
温泉宏基因组来源的D-来苏糖异构酶性质研究
文献摘要：
目的:从高温温泉宏基因组中挖掘能够高效催化合成稀有糖的新耐高温D-来苏糖异构酶.方法:从云南昌宁鸡飞温泉底泥中提取宏基因组DNA并进行高通量测序,经基因注释及序列比对鉴定D-来苏糖异构酶基因,构建大肠杆菌异源表达载体并诱导表达,通过亲和层析纯化重组蛋白并对其性质研究.结果:从温泉底泥宏基因组测序结果中鉴定得到8个D-来苏糖异构酶基因,选择4个基因进行异源表达,其中JF-LI1和JF-LI4在大肠杆菌中成功表达并检测到酶活性.研究表明,JF-LI1和JF-LI4的最适温度分别为70℃和75℃.JF-LI4具有较宽的作用温度和良好的热稳定性,在30-100℃的温度范围内剩余40％以上的酶活力.JF-LI1和JF-LI4的最适pH分别为7.0和7.5,在中性偏酸性条件下具有较高的活力和较强的稳定性.重组JF-LI1和JF-LI4具有较宽的底物谱,除了对D-来苏糖活性最高外,对L-核糖、L-核酮糖、D-果糖和D-甘露糖均具有活性.重组JF-LI1和JF-LI4对L-核糖的催化效率分别为0.56 L/(mmol·s-1)和0.61 L/(mmol·s-1),是目前已知的D-来苏糖异构酶中最高的.结论:从高温温泉宏基因组中获得8个新的D-来苏糖异构酶基因,对JF-LI1和JF-LI4进行异源表达和性质研究,具有pH稳定性好、热稳定性强以及底物特异性宽泛的特点,在制药、食品、化妆品等工业领域有重要的应用潜力.
文献关键词：
D-来苏糖异构酶;高温温泉;宏基因组;稀有糖;功能糖
中图分类号：
作者姓名：
苏雅丽;陈凤贞;石贤爱;王国增
作者机构：
福州大学生物科学与工程学院 福州 350108;福州大学福建省医疗器械和医药技术重点实验室 福州 350108
文献出处：
引用格式：
[1]苏雅丽;陈凤贞;石贤爱;王国增-.温泉宏基因组来源的D-来苏糖异构酶性质研究)[J].中国生物工程杂志,2022(09):27-38
A类：
高温温泉,LI1
B类：
来苏糖,异构酶,高效催化,催化合成,稀有糖,耐高温,云南昌宁,飞温,底泥,基因注释,序列比对,酶基因,大肠杆菌,异源表达,表达载体,诱导表达,亲和层析,层析纯化,重组蛋白,宏基因组测序,JF,LI4,热稳定性,酶活力,酸性条件,底物谱,核糖,果糖,甘露糖,催化效率,底物特异性,宽泛,制药,化妆品,工业领域,功能糖
AB值：
0.200963
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