典型文献
新型二合一 PiggyBac转座系统的构建及功能验证
文献摘要：
目的:PiggyBac(PB)转座子是一种可移动的遗传元件,采用"剪切和粘贴"机制在载体和染色体之间进行转座;通过将转座子元件和转座酶表达框整合到一个表达载体中,构建简便易用的二合一PB转座系统.方法:通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)获取PiggyBac转座系统所需转座子元件和转座酶表达框,利用T4 DNA连接酶将转座酶表达框插入到pUC18载体上,再利用Gibson同源重组技术将转座子元件与重组载体结合构建二合一 PB转座系统;使用该系统携带的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)以及功能性损伤抑制蛋白(damage-suppressing protein,DSUP)检测其有效性及可靠性.结果:在所有筛选获得的嘌呤霉素抗性细胞中,EGFP都是明亮可见;利用此二合一 PB转座系统成功获得了可高效表达功能性损伤抑制蛋白的稳定细胞系,证明外源基因可被有效整合到基因组DNA中并表达.结论:成功构建了新型二合一 PB转座系统,使稳定表达细胞系的建立更加经济简便.
文献关键词：
PiggyBac 转座子;稳定转染;EGFP
中图分类号：
作者姓名：
张尧仓;彭玉;丁可昕;台福敏;郑晓飞;秦宜德;付汉江
作者机构：
安徽医科大学基础医学院 合肥 230032;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所 放射生物学北京市重点实验室 北京 100850
文献出处：
引用格式：
[1]张尧仓;彭玉;丁可昕;台福敏;郑晓飞;秦宜德;付汉江-.新型二合一 PiggyBac转座系统的构建及功能验证)[J].中国生物工程杂志,2022(06):39-46
A类：
DSUP
B类：
二合一,PiggyBac,功能验证,PB,转座子,可移动,粘贴,转座酶,合到,表达载体,易用,聚合酶链式反应,polymerase,chain,reaction,T4,连接酶,pUC18,Gibson,同源重组,重组技术,重组载体,增强型绿色荧光蛋白,enhanced,green,fluorescent,protein,EGFP,damage,suppressing,嘌呤霉素,明亮,高效表达,表达功能,稳定细胞系,外源基因,有效整合,稳定表达细胞系,稳定转染
AB值：
0.321383
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
