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CHO细胞基因组NW-003614092.1内稳定表达位点的发现
文献摘要：
目的:获得中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells,CHO)内稳定表达位点信息,为构建重组蛋白CHO稳定表达株、缩短研发时间线提供信息明确的稳定位点.方法:对慢病毒随机整合Zsgreen1基因的具有潜在稳定表达位点的CHO-K1-1d2细胞株进行连续传代培养,验证表达稳定性;通过染色体步移分析慢病毒载体整合位点,并利用CRISPR/Cas9技术验证位点的可编辑性.结果:CHO-K1-1d2细胞在连续贴壁培养20代、悬浮培养50代过程中,能够100％发绿色荧光,且荧光强度稳定,能够稳定表达Zsgreen1蛋白;染色体步移分析测序结果表明,CHO-K1-1d2细胞中慢病毒载体整合于CHO细胞基因组NW-003614092.1上第1 159 463与1 159 467碱基间;共转染sgRNA与Cas9质粒后,测序结果表明,该位点可被CRISPR/Cas9技术编辑.结论:CHO细胞基因组NW-003614092.1内存在一个信息明确的、能够被CRISPR/Cas9技术编辑的稳定表达位点.
文献关键词：
CHO;稳定位点;染色体步移;CRISPR/Cas9
中图分类号：
作者姓名：
瞿丽丽;丁学峰;蔡燕飞;鲁晨;李华钟;金坚;陈蕴
作者机构：
江南大学生命科学与健康工程学院 无锡 214122;江南大学生物工程学院 无锡 214122
文献出处：
引用格式：
[1]瞿丽丽;丁学峰;蔡燕飞;鲁晨;李华钟;金坚;陈蕴-.CHO细胞基因组NW-003614092.1内稳定表达位点的发现)[J].中国生物工程杂志,2022(06):12-19
A类：
Zsgreen1
B类：
CHO,NW,稳定表达,中国仓鼠卵巢细胞,Chinese,hamster,ovary,cells,位点信息,重组蛋白,时间线,稳定位点,K1,1d2,细胞株,连续传代,传代培养,表达稳定性,染色体步移,慢病毒载体,整合位点,CRISPR,Cas9,技术验证,可编辑性,贴壁培养,悬浮培养,发绿,荧光强度,碱基,共转染,sgRNA,质粒,该位,技术编辑
AB值：
0.352024
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