典型文献
构建可合成非天然辅酶的圆红冬孢酵母工程菌
文献摘要：
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)及其还原态是生物体通用的氧化还原辅酶和重要小分子,参与胞内众多代谢反应,因此调控NAD水平不仅难以选择性作用于代谢途径,还常常产生意外的生物学效应.最近研究发现利用非天然辅酶烟酰胺胞嘧啶二核苷酸(nicotinamide cytosine dinucleotide,NCD),可构建正交的氧化还原催化体系,为调控胞内代谢提供了新机遇.为实现在产油酵母圆红冬孢酵母中建立NCD介导的氧化还原代谢,采用农杆菌介导转化方法,在基因组整合表达密码子优化的NCD合酶(NcdS)编码基因NCDS,获得系列有效表达NcdS的工程菌株.酶偶联法分析发现,工程菌细胞裂解液NcdS酶活达8.1×10-3 U/OD600nm.通过高效液相色谱法(HPLC)和超高分辨率质谱检测,确定细胞裂解液可催化合成NCD.在培养基内补加5.0 mmol/L烟酰胺核糖后,工程菌胞内合成NCD达41.6 μmol/L.对工程菌进行发酵和油脂提取,发现胞内表达NCD合酶未导致细胞产油性能降低,后续可通过表达其他NCD偏好性酶,有望在圆红冬孢酵母中建立受NCD调控的油脂合成代谢体系.
文献关键词：
圆红冬孢酵母;非天然辅酶;烟酰胺胞嘧啶二核苷酸;合成生物学;氧化还原代谢
中图分类号：
作者姓名：
梁世玉;万里;郭潇佳;王雪颖;吕力婷;胡英菡;赵宗保
作者机构：
中国科学院大连化学物理研究所 大连 116023;中国科学院大学 北京 100049
文献出处：
引用格式：
[1]梁世玉;万里;郭潇佳;王雪颖;吕力婷;胡英菡;赵宗保-.构建可合成非天然辅酶的圆红冬孢酵母工程菌)[J].中国生物工程杂志,2022(05):58-68
A类：
非天然辅酶,圆红冬孢酵母,烟酰胺胞嘧啶二核苷酸,氧化还原代谢,NcdS,NCDS
B类：
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,nicotinamide,adenine,dinucleotide,NAD,生物体,小分子,多代,代谢反应,代谢途径,生意,生物学效应,cytosine,催化体系,胞内代谢,产油酵母,农杆菌介导,转化方法,基因组整合,整合表达,密码子优化,编码基因,列有,有效表达,工程菌株,偶联,OD600nm,高效液相色谱法,HPLC,超高分辨率,高分辨率质谱,质谱检测,催化合成,补加,烟酰胺核糖,油脂提取,油性,过表达,偏好性,油脂合成,合成代谢,合成生物学
AB值：
0.291572
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