典型文献
靶向PSMA多价纳米抗体的制备及其生物学活性表征
文献摘要：
目的:构建原核表达系统,制备靶向前列腺特异性膜抗原(prostate-specific membrane antigen,PSMA)多价纳米抗体并初步评价其生物学活性.方法:Bglbrick法构建多价纳米抗体表达载体,转化至大肠杆菌表达并利用亲和层析法纯化.联合蛋白质电泳和Western blot验证纯化产物,BCA法检测表达量.通过免疫荧光和流式细胞术定性评估PSMA特异性亲和能力,细胞ELISA法定量检测PSMA亲和水平,流式细胞术检测内吞效率.结果:成功构建靶向PSMA单价、二价、三价和四价纳米抗体大肠杆菌表达菌株.发酵结果表明四种纳米抗体均能在摇瓶水平实现高效可溶表达,其中二价纳米抗体表达量最高[(259.14±23.56)mg/L],单价纳米抗体表达量最低[(100.58±6.27)mg/L].亲和实验结果证实四种纳米抗体均能特异性识别并结合PSMA阳性肿瘤细胞,与单价纳米抗体相比,二价、三价和四价纳米抗体对PSMA亲和能力分别提高了3.32倍、2.29倍和2.03倍.最后的内吞实验显示四种纳米抗体均能被PSMA阳性肿瘤细胞高效摄取,30 min内的摄取率均在80％以上.结论:靶向PSMA的多价纳米抗体,尤其是二价纳米抗体,具有比单价纳米抗体更高的产量和亲和水平,且具备不亚于单价纳米抗体的内吞效率,是未来基于PSMA肿瘤诊疗试剂开发的重要候选.
文献关键词：
前列腺癌;前列腺特异性膜抗原(PSMA);多价纳米抗体
中图分类号：
作者姓名：
鲍奕恺;洪皓飞;施杰;周志昉;吴志猛
作者机构：
江南大学生物工程学院 糖化学与生物技术教育部重点实验室 无锡 214122
文献出处：
引用格式：
[1]鲍奕恺;洪皓飞;施杰;周志昉;吴志猛-.靶向PSMA多价纳米抗体的制备及其生物学活性表征)[J].中国生物工程杂志,2022(05):37-45
A类：
多价纳米抗体,Bglbrick
B类：
PSMA,生物学活性,原核表达,表达系统,前列腺特异性膜抗原,prostate,specific,membrane,antigen,初步评价,抗体表达,表达载体,大肠杆菌表达,亲和层析,层析法,蛋白质电泳,blot,纯化产物,BCA,免疫荧光,流式细胞术,定性评估,定量检测,内吞,单价,二价,三价,四价,摇瓶,平实,中二,特异性识别,肿瘤细胞,摄取,和亲,不亚于,肿瘤诊疗,前列腺癌
AB值：
0.224365
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