目的:本研究旨在探讨钙离子浓度对脂肪干细胞(ADSCs)增殖和成肌分化的影响.方法:利用抽脂手术废弃脂肪提取脂肪干细胞,进行体外细胞培养和鉴定.设立正常细胞培养液为对照组,在培养液中添加不同浓度的钙离子(分别为0.001 mol/mL、0.002 mol/mL、0.003 mol/mL、0.004 mol/mL、0.005 mol/mL共5组)为实验组,测定在48 h和96 h条件下不同浓度钙离子(Ca2+)对cck8反应细胞增殖的影响.同时通过TGF-β诱导成肌分化,测定不同钙离子浓度下Ca2+信号相关蛋白的表达,并通过CCK-8检测评价其分化水平.另外通过免疫荧光和PCR检测细胞表面特异性抗原(α-SMA,SMMHC)的表达水平.各组间比较应用独立样本t检验,P＜0.05为差异具有统计学意义.结果:显微镜下观察可见原代ADSCs细胞培养0.5天后贴壁生长,形态呈圆或椭圆形,而TGF-β诱导ADSCs成肌分化可见细胞呈梭形;实验组中,钙浓度＜0.002 mmol/mL时,脂肪干细胞增殖得到显著促进(t=10.08,df=10,P＜0.05);钙浓度＜0.003 mmol/mL时,脂肪干细胞的成肌分化也显著增加,同时免疫荧光和PCR检测发现低浓度下α-SMA,SMMHC的表达均显著增加(P＜0.05),而高钙浓度下两者均受到抑制(P＜0.05).结论:低钙浓度(钙浓度＜0.002 mmol/mL)可显著促进脂肪干细胞增殖和成肌分化,而高钙浓度下两者均受到抑制.

钙离子;脂肪干细胞;成肌分化;细胞增殖;表面特异性抗原

陈皓;柯晨;张梓凯;李力群;林明

温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 浙江温州325000;温州医科大学附属第一医院 浙江温州325000

现代生物医学进展

[1]陈皓;柯晨;张梓凯;李力群;林明-.钙离子浓度对脂肪干细胞增殖和成肌分化的影响)[J].现代生物医学进展,2022(07):1206-1210

表面特异性抗原

钙离子浓度,脂肪干细胞,干细胞增殖,成肌分化,ADSCs,体外细胞,细胞培养,培养液,Ca2+,cck8,TGF,CCK,检测评价,免疫荧光,细胞表面,SMA,SMMHC,显微镜下,原代,贴壁,椭圆形,钙浓度,df,高钙,低钙

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