典型文献
重组降钙素原的原核表达及在质控品中的应用研究
文献摘要：
目的 构建重组降钙素原(PCT)原核表达系统,探索超声裂解对重组PCT蛋白稳定性的影响,为PCT质控品的开发与应用提供参考.方法 通过基因工程方法构建PCT表达质粒,利用大肠杆菌原核表达系统经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组PCT蛋白,分析其在三种不同免疫检测系统(罗氏cobas、梅里埃Vidas及天宝颂原FIA-T-01)中的免疫反应性,比较不同超声裂解功率对重组PCT蛋白稳定性及提取产率的影响,以荧光免疫检测系统评估质控品瓶间均一性及在2～8℃、37℃条件下的保存稳定性.结果 成功构建了 PCT-pET32a原核表达载体,重组PCT蛋白经IPTG诱导高效表达,分子量约35×103 Mr;超声时长20 min(超声3 s、间断2 s和功率120 W)裂解时,对重组PCT蛋白的稳定性影响最小,产量较高.以此工艺制备的质控品在三种主流PCT免疫检测系统中均表现出良好的免疫反应性,瓶间均匀性差异无统计学意义(F＜2.39).质控品在2～8℃贮存15个月、37℃贮存7d性能稳定.结论 超声裂解工艺会影响重组PCT蛋白的稳定性,制备的重组PCT蛋白可广泛用于不同检测系统质控检测,为临床检测质控提供稳定廉价的原料来源.
文献关键词：
降钙素原;质控品;裂解工艺;均一性;稳定性
中图分类号：
作者姓名：
王小明;肖斌;张雷;卢艳华;李杉;周志伟;李林海
作者机构：
华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006;广州天宝颂原生物科技开发有限公司,广东广州510663;中国人民解放军南部战区军区总医院检验科,广东广州510010
文献出处：
引用格式：
[1]王小明;肖斌;张雷;卢艳华;李杉;周志伟;李林海-.重组降钙素原的原核表达及在质控品中的应用研究)[J].热带医学杂志,2022(09):1191-1195
A类：
Vidas
B类：
降钙素原,质控品,PCT,表达系统,超声裂解,开发与应用,基因工程,质粒,大肠杆菌,异丙基,半乳糖,糖苷,IPTG,诱导表达,免疫检测系统,罗氏,cobas,梅里,天宝,FIA,免疫反应性,荧光免疫,系统评估,均一性,pET32a,原核表达载体,导高,高效表达,分子量,Mr,稳定性影响,工艺制备,贮存,7d,裂解工艺,系统质,临床检测,廉价
AB值：
0.312424
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