目的:探讨活血消瘿方含药血清对脂多糖(LPS)诱导的甲状腺滤泡上皮细胞(TFECs)炎性损伤、凋亡及Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路的影响.方法:体外培养无菌分离的大鼠TFECs,使用LPS诱导构建TFECs损伤模型.制备活血消瘿方含药血清和对照血清.分别用0(对照血清)、0.5％、1％、2.5％、5％、10％、20％、40％、80％活血消瘿方含药血清和LPS处理TFECs,MTT法检测吸光度值并计算其增殖抑制率和半数抑制浓度(IC50).TFECs随机分为对照组、模型组、低浓度活血消瘿方含药血清组、中浓度活血消瘿方含药血清组、高浓度活血消瘿方含药血清组及优甲乐含药血清组,并给予相应干预.实验结束后,收集细胞,观察各组TFECs形态;ELISA法检测TNF-α、IL-6水平;流式细胞仪分析细胞凋亡率;Western blotting检测胶质标记蛋白Tg、增殖凋亡相关蛋白(Caspase-3、Caspase-8、Bax、Bcl-2)及JAK2/STAT3通路相关蛋白表达水平.结果:不同浓度活血消瘿方含药血清处理后细胞增殖抑制率均明显升高(P<0.05),具有浓度依赖性.活血消瘿方含药血清对LPS诱导的TFECs细胞增殖抑制率的IC50是20％.与对照组比较,模型组TFECs变大、排列松散、胶质减少、折射不清晰,Tg、Bcl-2和p53蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),凋亡率、TNF-α水平、IL-6水平、Caspase-3蛋白表达、Caspase-8蛋白表达、Bax蛋白表达及JAK2、STAT3磷酸化水平均明显升高(P<0.05).与模型组比较,低、中、高浓度活血消瘿方含药血清组和优甲乐含药血清组TFECs排列逐渐紧密、胶质逐渐增多,Tg、Bcl-2和p53蛋白表达均明显升高(P<0.05),凋亡率、TNF-α水平、IL-6水平、Caspase-3蛋白表达、Caspase-8蛋白表达、Bax蛋白表达及JAK2、STAT3磷酸化水平均明显降低(P<0.05),且各浓度活血消瘿方含药血清组不同指标水平呈现剂量依赖性.结论:活血消瘿方含药血清可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路,减轻LPS诱导的TFECs炎性损伤,并抑制细胞凋亡.

结节性甲状腺肿;活血消瘿方;脂多糖;甲状腺滤泡上皮细胞;炎性损伤;凋亡;JAK2/STAT3通路

裴迅;左新河;赵勇;李扬;付畅

湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院,湖北 武汉 430074

中医药导报

[1]裴迅;左新河;赵勇;李扬;付畅-.活血消瘿方含药血清对脂多糖诱导的甲状腺滤泡上皮细胞炎性损伤、凋亡及JAK2/STAT3通路的影响)[J].中医药导报,2022(06):14-19

活血消瘿方,TFECs

含药血清,脂多糖,甲状腺滤泡上皮细胞,炎性损伤,JAK2,STAT3,LPS,Janus,信号转导和转录激活因子,体外培养,无菌,损伤模型,MTT,吸光度值,增殖抑制,抑制率,半数抑制浓度,IC50,优甲乐,流式细胞仪,细胞凋亡率,blotting,Tg,增殖凋亡,凋亡相关蛋白,Caspase,Bax,Bcl,蛋白表达水平,浓度依赖性,p53,磷酸化,同指,剂量依赖,量依赖性,结节性甲状腺肿

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