研究斜纹夜蛾Spodoptera litura化学感受蛋白SlitCSP2的表达模式、组织定位及与配体结合特性,为揭示SlitCSP2在化学通讯中的功能提供理论依据.利用RT-qPCR检测了SlitCSP2在蛹及雌、雄成虫各组织的基因表达水平;Western blot方法检测了SlitCSP2在幼虫期和雄成虫头部、触角和足部的蛋白表达水平;利用免疫组织化学技术对SlitCSP2在幼虫各龄期的分布情况进行定位分析;利用荧光竞争结合试验检测SlitCSP2与13种非挥发性化合物的结合特性.RT-qPCR结果表明,SlitCSP2在3龄幼虫表达量最高,3～6龄表达量逐渐降低;成虫阶段雄成虫足部及胸部和雌成虫头部及翅的表达量最高,且雄成虫头部、足部和胸部的表达量显著高于雌成虫.Western blot结果显示,SlitCSP2在3龄幼虫头部(去触角)的蛋白表达水平较高.免疫组化结果表明,SlitCSP2在幼虫阶段主要分布于头部、口器和胸足;在雄成虫中,SlitCSP2主要分布于足部前跗节和足部外骨骼内侧.荧光竞争结合试验表明,SlitCSP2与单宁(Ki=1.77)、花青素(Ki=2.34)和叶酸(Ki=4.56)有很强的结合能力.本研究明确了SlitCSP2在幼虫各龄期和成虫各组织的表达特征.根据免疫定位及荧光竞争结合试验结果,我们推测SlitCSP2可能在斜纹夜蛾寄主选择和解毒过程中发挥重要作用.

斜纹夜蛾;SlitCSP2;原核表达;组织表达;结合特性

汪洋;陈俊元;许汝冰;王福莲;李传仁;谭晓玲;董小林

长江大学农学院,荆州 434025;湖北省烟草公司,武汉 430000;中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100193

中国生物防治学报

[1]汪洋;陈俊元;许汝冰;王福莲;李传仁;谭晓玲;董小林-.斜纹夜蛾化学感受蛋白SlitCSP2的表达模式定位及配体结合特性分析)[J].中国生物防治学报,2022(06):1495-1507

SlitCSP2,免疫定位

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