典型文献
蜜蜂α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达
文献摘要:
α-淀粉酶是一种可以水解淀粉中α-1,4-糖苷键的水解酶,它将大分子的淀粉水解为小分子的葡萄糖.对来自蜜蜂的α-淀粉酶进行密码子优化和全基因合成,将合成后的基因克隆至穿梭载体pYES2-α-factor,转化进宿主菌INVSc1.通过碘染法筛选鉴定阳性克隆子,确定重组菌株最佳诱导后产酶时间为22 h,利用DNS法确定该酶最适pH为9.0,最适温度为50℃,在最适条件下(28℃,诱导时间22 h)诱导,重组菌表达α-淀粉酶最大产酶浓度为2809.1 U/mL.诱导表达收集其上清粗酶液后,经SDS-PAGE电泳,测定其分子量大约为60 kDa,比预期分子量稍大,可能与糖基化有关.
文献关键词:
蜜蜂;α-淀粉酶;密码子优化;酿酒酵母
中图分类号:
作者姓名:
李蓬茸;曾维斯;彭芳;吴菁;李鑫;闫达中
作者机构:
武汉轻工大学 生命科学与技术学院,武汉430023
文献出处:
引用格式:
[1]李蓬茸;曾维斯;彭芳;吴菁;李鑫;闫达中-.蜜蜂α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达)[J].武汉轻工大学学报,2022(06):53-59
A类:
碘染法
B类:
蜜蜂,淀粉酶,酶基因,酿酒酵母,糖苷键,水解酶,大分子,淀粉水解,小分子,密码子优化,全基因,基因合成,基因克隆,穿梭,pYES2,宿主菌,INVSc1,筛选鉴定,隆子,重组菌株,产酶,DNS,诱导时间,诱导表达,上清,粗酶液,SDS,PAGE,电泳,分子量,kDa,糖基化
AB值:
0.451265
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