典型文献
沙门氏菌活菌实时PCR检测方法研究
文献摘要：
建立一种叠氮溴化乙锭结合荧光PCR(Ethidium monoazide bromide real-time PCR,EMA-RT-PCR)快速检测沙门氏菌活菌的技术.以沙门氏菌f imY基因为靶点设计特异性引物,通过菌液浓度及叠氮溴化乙锭(Ethidium monoazide bromide,EMA)相关反应条件的优化,建立沙门氏菌活菌的EMA-RT-PCR方法.经反应条件优化后,当EMA浓度为2.5μg/mL,暗反应5 min,曝光反应10 min条件下对106 CFU/mL的沙门氏菌抑制效果最好,活菌的扩增没有影响,死菌的扩增受到抑制,所构建的沙门氏菌EMA-RT-PCR方法的检测灵敏度为2.5×102 CFU/mL.用该方法检测8批次受沙门氏菌人工污染的阳性样品,结果显示该方法均能正常检出带活菌的样本,检测时间为4～5 h,比传统检测时间大大缩短.EMA-RT-PCR方法能准确区分活死菌,适合作为沙门氏菌的快速初筛方式.
文献关键词：
沙门氏菌;叠氮溴化乙锭;实时荧光PCR;活菌
中图分类号：
作者姓名：
黎财慧;姚丽锋;张晴阳;丁琦;冯家望
作者机构：
拱北海关技术中心 珠海 519015
文献出处：
引用格式：
[1]黎财慧;姚丽锋;张晴阳;丁琦;冯家望-.沙门氏菌活菌实时PCR检测方法研究)[J].中国口岸科学技术,2022(10):71-78
A类：
叠氮溴化乙锭,Ethidium,imY
B类：
沙门氏菌,活菌,monoazide,bromide,real,EMA,快速检测,特异性引物,菌液浓度,关反,反应条件优化,暗反应,曝光,光反应,CFU,抑制效果,检测灵敏度,出带,检测时间,大大缩短,初筛
AB值：
0.214587
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