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微泡菌ALW1重组β-半乳糖苷酶的异源表达和酶学性质
文献摘要：
β-半乳糖苷酶催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,是乳制品加工中重要的酶.该研究将微泡菌ALW1菌株的β-半乳糖苷酶在大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达和纯化,研究其酶学性质.结果表明,微泡菌ALW1的β-半乳糖苷酶属于GH1家族,利用Ni-NTA Agarose亲和层析获得的重组β-半乳糖苷酶分子量约为64 ku.重组酶的最适反应温度为30℃,最适pH为4.5.温度低于25℃、pH 4.0～5.0条件下,β-半乳糖苷酶具有良好稳定性.重组β-半乳糖苷酶对DTT、吐温20和吐温80具有良好的耐受性;离子型去垢剂SDS和CTAB存在时,β-半乳糖苷酶几乎丧失活性.重组β-半乳糖苷酶的Km和Vmax分别为10.98 mmol/L和7.48 U/mg.结构模拟显示,微泡菌β-半乳糖苷酶的催化酸/碱残基和亲核残基分别为Glu186和Glu370.该研究为来自微泡菌ALW1的β-半乳糖苷酶在食品领域的应用奠定理论基础.
文献关键词：
微泡菌;β-半乳糖苷酶;酶学性质;分子对接
中图分类号：
作者姓名：
唐桂均;李鹤宾;朱艳冰;姜泽东;倪辉;李清彪;陈艳红
作者机构：
集美大学海洋食品与生物工程学院,福建厦门 361021;厦门医学院药学系,福建厦门 361023;福建省食品微生物与酶工程重点实验室,厦门市食品生物工程技术研究中心,福建厦门 361021
文献出处：
引用格式：
[1]唐桂均;李鹤宾;朱艳冰;姜泽东;倪辉;李清彪;陈艳红-.微泡菌ALW1重组β-半乳糖苷酶的异源表达和酶学性质)[J].现代食品科技,2022(09):111-118
A类：
微泡菌,ALW1,Agarose,Glu186,Glu370
B类：
半乳糖,糖苷酶,异源表达,酶学性质,酶催化,糖水,乳制品加工,大肠杆菌,BL21,DE3,GH1,NTA,亲和层析,分子量,ku,重组酶,反应温度,DTT,吐温,耐受性,离子型,去垢,SDS,CTAB,失活,Km,Vmax,结构模拟,残基,和亲,食品领域,分子对接
AB值：
0.252328
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