[目的]检测豆甾醇对前列腺间质细胞收缩的抑制作用.[方法]体外培养大鼠原代前列腺间质细胞,通过鬼笔环肽染色法对前列腺间质细胞进行表型鉴定;用细胞增殖及乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测豆甾醇对前列腺间质细胞活力和毒性的影响;用胶原凝胶收缩实验检测对前列腺间质细胞收缩功能的影响;运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法研究豆甾醇对收缩相关的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)的mRNA水平表达的影响;用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测豆甾醇对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的α-SMA表达的影响;流式细胞术检测豆甾醇对乙酰胆碱(ACh)诱导的细胞内钙离子浓度的影响.[结果]大鼠原代前列腺细胞培养获得的细胞以间质平滑肌细胞为主;浓度低于10μmol/L的豆甾醇对前列腺间质细胞的活力无明显影响,且无明显毒性;胶原凝胶实验结果显示,血清可以使前列腺间质细胞收缩,差异具有统计学意义(P<0.01),10μmol/L的豆甾醇可显著抑制该收缩作用,抑制率可达到77.1％,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,豆甾醇显著降低大鼠前列腺间质细胞中α-SMA和CollagenⅠmRNA水平的表达,差异具有统计学意义(P<0.01);Western Blot结果显示,豆甾醇可以抑制TGF-β1诱导的α-SMA蛋白的表达;流式细胞实验发现ACh刺激导致的钙离子浓度明显增加可以被豆甾醇显著抑制.[结论]豆甾醇可抑制前列腺间质收缩,其机制与抑制其钙离子内流有关.

豆甾醇;前列腺间质收缩;前列腺增生;α-平滑肌肌动蛋白;钙离子

马亚宣;吴垚锌;邵瑞;苗琳

天津中医药大学组分中药国家重点实验室,天津 301617;天津中医药大学中医药研究院,天津 301617;方剂学教育部重点实验室,天津 301617

天津中医药

[1]马亚宣;吴垚锌;邵瑞;苗琳-.豆甾醇通过抑制钙离子内流抑制大鼠前列腺间质细胞收缩)[J].天津中医药,2022(11):1445-1451

前列腺间质收缩

豆甾醇,内流,间质细胞,体外培养,养大,原代,鬼笔,环肽,染色法,表型鉴定,乳酸脱氢酶,LDH,试剂盒,细胞活力,实验检测,收缩功能,逆转录,聚合酶链反应,平滑肌肌动蛋白,SMA,Collagen,蛋白免疫印迹,Blot,转化生长因子,TGF,流式细胞术,乙酰胆碱,ACh,细胞内钙,钙离子浓度,前列腺细胞,细胞培养,平滑肌细胞,凝胶实验,抑制率,细胞实验,可抑制,前列腺增生

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