目的 研究丝裂霉素C诱导的DNA损伤的浓度和时间对293T细胞中范可尼贫血互补群B(FANCB),DNA损伤因子gammaH2AX,修复因子RAD51表达量的影响,探索FANCB在DNA损伤中的作用机理.方法 利用人293T细胞系作为研究载体,通过Western blot和qRT-PCR技术定量分析FANCB,gammaH2AX,RAD51在25μM丝裂霉素C浓度作用下,在1、3、5 h不同作用时间点评估FANCB,gammaH2AX,RAD51蛋白和基因表达水平差异;分析细胞在25、35、45、60μM丝裂霉素C浓度下作用3 h后gammaH2AX蛋白表达水平;siRNA敲低FANCB表达后FANCB、gammaH2AX和RAD51蛋白和基因表达检测.结果 相比对照组,在蛋白水平,gam-maH2AX表达在1、3 h对比0 h差异具有统计学意义(P均＜0.05),而5 h对比0 h差异无统计学意义(P =0.223);FANCB表达在1、3、5 h对比0h差异均具有统计学意义(P均＜0.05);RAD51表达在1、3、5 h对比0 h差异均具有统计学意义(P均＜0.05).在基因水平,FANCB在1、3、5 h和RAD51在1、3、5 h相比对照组均具有统计学意义(P均＜0.05);gammaH2AX蛋白表达水平与MMC浓度无明显关系.相比对照组,siRNA敲低组FANCB蛋白和基因表达下降,gammaH2AX蛋白表达上升,RAD51蛋白和基因表达下降.结论 在丝裂霉素C造成的293T DNA损伤模型中,FANCB在同源重组DNA修复途径中对DNA损伤具有潜在的调控功能.

小耳畸形;DNA损伤;修复;范可尼贫血互补群B;GammaH2AX;RAD51;丝裂霉素C

岑璞;陈斌;江晨艳;柴永川;蒋刈;石润杰

上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉头颈外科,上海 200011;上海交通大学医学院耳科学研究所,上海 200215;上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室,上海 200215

中国耳鼻咽喉颅底外科杂志

[1]岑璞;陈斌;江晨艳;柴永川;蒋刈;石润杰-.范可尼贫血互补群B对丝裂霉素C诱导的293T细胞DNA损伤修复的研究)[J].中国耳鼻咽喉颅底外科杂志,2022(02):50-55

FANCB,gammaH2AX,maH2AX,GammaH2AX

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