目的 探讨胞质分裂作用因子1(dedicator of cytokinesis 1,DOCK1)在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)中的表达及其对癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响及相关机制.方法 选取MM患者骨髓组织及人MM细胞株U266和RPMI 8266进行研究,采用实时荧光定量PCR(real time-quantitative PCR,RT-qPCR)法检测MM骨髓组织及细胞中DOCK1相对表达;构建敲低DOCK1表达细胞系,采用CCK-8法和流式细胞术检测DOCK1对MM细胞增殖与凋亡的影响;Western blot实验检测细胞增殖相关蛋白(c-Myc,cyclin D1)、凋亡相关蛋白(Bax,Bcl-2)、自噬相关蛋白(LC3-II/LC3-I,P62)及AMPK/mTOR通路相关蛋白的表达水平.结果 LV-DOCK1-shRNA2组的U266和RPMI 8266细胞增殖率在24,48和72h均显著低于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义(FU266=21.130～100.108,FRPMI8266=35.067～95.677,均P<0.001).LV-DOCK1-shRNA2组的U266和RPMI 8266细胞增殖相关蛋白c-Myc,cyclin D1表达水平均显著低于阴性对照组和空白对照组(FU266=56.061,71.584;FRPMI8266=93.248,62.146,均P<0.001).LV-DOCK1-shRNA2组的U266,RPMI 8266细胞24h,48h凋亡率显著高于阴性对照组和空白对照组(FU266=77.051,61.533;FRPMI8266=60.868,68.306,均P<0.001).与空白对照组和阴性对照组比较,LV-DOCK1-shRNA2组U266和RPMI 8266细胞凋亡相关蛋白Bax表达水平明显升高,Bcl-2表达水平明显降低(FU266=92.588,21.940;FRPMI8266=82.736,14.511,均P<0.05);自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I表达水平明显升高,P62表达水平明显降低(FU266=147.1,26.342;FRPMI8266=173.300,31.477,均P<0.05).LV-DOCK1-shRNA2组U266,RPMI 8266细胞AMPK/mTOR通路相关蛋白p-AMPK表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组(FU266=40.542,FRPMI8266=40.892,均P<0.05);p-mTOR表达水平明显低于阴性对照组和空白对照组(FU266=38.707,FRPMI8266=43.002,均P<0.05).在LV-DOCK1-shRNA2组再次转染DOCK1过表达质粒使其表达恢复后,p-AMPK和p-mTOR表达水平也被逆转得到恢复.结论 DOCK1在多发性骨髓瘤细胞中具有促癌作用,其机制可能与通过抑制AMPK/mTOR通路,抑制多发性骨髓瘤细胞的凋亡和自噬有关.

多发性骨髓瘤;胞质分裂作用因子;AMPK/mTOR通路;增殖;凋亡;自噬

李丹;张忠山;李洵婷;曹苏娟

湘南学院附属医院肿瘤科,湖南郴州 423000

现代检验医学杂志

[1]李丹;张忠山;李洵婷;曹苏娟-.DOCK1通过AMPK/mTOR通路对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡和自噬的调控机制研究)[J].现代检验医学杂志,2022(03):62-68

胞质分裂作用因子,dedicator,FU266,FRPMI8266

DOCK1,AMPK,mTOR,多发性骨髓瘤细胞,凋亡和自噬,调控机制,cytokinesis,multiple,myeloma,MM,癌细胞,相关机制,骨髓组织,细胞株,real,quantitative,qPCR,相对表达,敲低,细胞系,CCK,流式细胞术,细胞增殖与凋亡,blot,实验检测,Myc,cyclin,D1,凋亡相关蛋白,Bax,Bcl,自噬相关蛋白,LC3,II,P62,LV,shRNA2,细胞增殖率,72h,空白对照,24h,48h,凋亡率,转染,过表达质粒,转得,促癌作用

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