目的 探讨瑞香素通过抑制硫氧还蛋白结合蛋白(Thioredoxin-interacting protein,TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NL-RP3)信号通路来对氧糖剥夺/复氧(Oxygen-glucose deprivation/Reoxygenation,OOGD/R)诱导的海马神经元炎症反应和凋亡的影响.方法 对体外培养的小鼠海马神经元HT-22做OGD/R处理诱导建立细胞损伤模型,采用细胞计数试剂盒-8(Cell counting Kit-8,CCK-8)实验检测0、5、10、20、40、80μmol/L的瑞香素对其细胞活力的影响,筛选出最佳作用水平;将体外培养的H T-22细胞随机分为对照组、模型组、瑞香素(40μmol/L)组、TXNIP空载(转染TXNIP空载质粒)组、TXNIP过表达(转染TXNIP过表达质粒)组、瑞香素(40μmol/L)+TXNIP过表达组,以瑞香素和质粒提前处理12 h后进行OGD/R诱导建立细胞损伤模型;采用二苯甲亚胺、三氯化氢2′-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5′-二-1H-苯并咪唑(2′-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole,trihydrochloride,Hoechst)33258染色及流式细胞实验检测各组H T-22细胞凋亡情况;采用试剂盒检测各组H T-22细胞线粒体膜电位;应用酶标仪测量各组H T-22细胞肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(Interleukin,IL)-6、IL-1β、IL-18、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)及乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)释放水平;采用免疫印迹实验检测各组HT-22细胞TXNIP/NL-RP3通路蛋白表达水平.结果 选择40μmol/L瑞香素处理OGD/R诱导HT-22细胞进行后续实验;与对照组比较,模型组HT-22细胞凋亡率、细胞TNF-α,IL-6,IL-1β,IL-18及ROS水平、细胞LDH释放水平、细胞TXNIP,NLRP3及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(Cysteine-containing aspartate-specific proteases-1,Caspase-1)蛋白表达水平明显升高(P<0.05),线粒体膜电位、细胞SOD及CAT水平明显降低(P<0.05).分别与模型组、瑞香素+TXNIP过表达组比较,瑞香素组HT-22细胞凋亡率、细胞TNF-α,IL-6,IL-1β,IL-18及ROS水平、细胞LDH释放水平、细胞TXNIP,NLRP3及Caspase-1蛋白表达水平均降低(P<0.05),线粒体膜电位、细胞SOD及CAT水平均升高(P<0.05);TXNIP过表达组HT-22细胞凋亡率、细胞TNF-α,IL-6,IL-1β,IL-18及ROS水平、细胞LDH释放水平、细胞TXNIP,NLRP3及Caspase-1蛋白表达水平均升高(P<0.05),线粒体膜电位、细胞SOD及CAT水平均降低(P<0.05);TXNIP空载组HT-22细胞各指标水平均无明显变化(P>0.05).结论 瑞香素可通过抑制TXNIP/NLRP3信号通路来降低OGD/R诱导的ROS和炎性因子过量表达,抑制炎症和氧化应激反应,缓解海马神经元线粒体损伤,减轻神经元凋亡.

瑞香素;硫氧还蛋白结合蛋白/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3;氧糖剥夺/复氧海马神经元;炎症;凋亡

赵敏;谢丽华;逯琴

041000 山西省临汾市人民医院神经内科

卒中与神经疾病

[1]赵敏;谢丽华;逯琴-.瑞香素通过抑制TXNIP/NLRP3信号通路来减轻OGD/R诱导的海马神经元炎症反应和凋亡)[J].卒中与神经疾病,2022(06):503-510

Reoxygenation,OOGD,Hydroxyphenyl,piperazinyl,trihydrochloride

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