目的 探讨蛋白酶激活受体1(Protease-activated receptors 1,PAR1)对蛛网膜下腔出血(Sub-arachnoid hemorrhage,SAH)大鼠神经细胞自噬、神经肽及脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)水平的影响.方法 Sham组(假手术组)、SAH组(SAH模型大鼠10只)、BDNF组(SAH模型大鼠给予BDNF干预)、PAR1抑制剂组(SAH模型大鼠给予PAR1抑制剂干预)和联合组(SAH模型大鼠给予BDNF联合PAR1抑制剂干预)均9只;采用放射免疫法检测血液及脑脊液中神经肽γ(Neuropeptide Y,NPY)水平,苏木精-伊红(Hematoxylin eosin,HE)染色检测脑皮质组织形态,免疫印迹检测自噬蛋白表达水平,缺口末端标记技术(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡率,免疫组化检测BDNF及酪氨酸激酶受体B(Tyrosine Kinase receptor B,TrKB)蛋白表达阳性细胞数.结果 Sham组大鼠脑组织结构未见异常,染色区细胞浆及细胞核染色清晰,无神经元缺失;SA H组大鼠于结构松散的软化灶内存在大量炎性细胞,存在神经细胞坏死;BDNF组、PAR1抑制剂组和联合组脑组织病理学变化均改善,神经元排列规则及数目较多.与Sham组比较,SAH组大鼠血液及脑脊液中NPY水平、脑皮质中自噬相关基因5(Autophagy-related gene 5,Atg5)、微管相关蛋白1轻链3(Microtuble-associated protein 1 light chain 3,LC3)-II蛋白表达水平及脑细胞凋亡率升高(P<0.05),泛素结合蛋白P62(P62)蛋白表达水平及BDNF,TrkB阳性细胞数降低(P<0.05);与SAH组比较,BDNF组、PAR1抑制剂组大鼠血液及脑脊液NPY水平、脑皮质中Atg5,LC3-II蛋白表达水平及脑细胞凋亡率降低(P<0.05),p62蛋白表达水平及BD-NF,TrkB阳性细胞数升高(P<0.05),且联合组效果更为显著,与BDNF组、PAR1抑制剂组比较差异显著(P<0.05);BDNF组、PAR1抑制剂组上述各项指标水平比较均无显著差异(P>0.05).结论 PAR1抑制剂SCH79797通过抑制血液及脑脊液中NPY表达,降低自噬蛋白Atg5及LC3-II活性,减少蛛网膜下腔出血大鼠脑细胞凋亡,其机制可能与上调BDNF及TrkB表达水平有关.

蛛网膜下腔出血;神经细胞;自噬;神经肽;蛋白酶激活受体1

郑嘉伟;余游;冯大磊

473000 南阳南石医院神经外科

卒中与神经疾病

[1]郑嘉伟;余游;冯大磊-.PAR1对蛛网膜下腔出血大鼠神经细胞自噬、神经肽及BDNF水平的影响)[J].卒中与神经疾病,2022(02):138-144

PAR1,Microtuble,SCH79797

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0.301966