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人滋养层干细胞的分离培养与鉴定
文献摘要：
目的 建立可在体外培养的人滋养层干细胞系(hTSCs),为研究胎盘的发育机制提供新的模型.方法 取临沂市妇幼保健院生殖医学科患者捐赠的发育正常的5～6 d囊胚,利用延时培养技术分离获取hTSCs,进行细胞核型分析,利用免疫荧光技术和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测hTSCs标记物的表达,并对hTSCs的侵袭能力、分化能力以及内分泌功能进行检测.结果 本实验成功建立4株hTSCs,其均具有正常细胞核型.免疫荧光技术检测显示,第8代hTSCs中转录因子活化蛋白2C(TFAP2C)、细胞角蛋白7(CK7)、转录因子GATA结合蛋白3(GATA-3)稳定表达;RT-qPCR检测结果显示,第8、16代hTSCs中CK7、GATA3、TFAP2C、TEAD4基因的相对表达量无显著性差异(P>0.05);分化组第2、4、6天穿过trasnswell微孔的细胞数量均多于未分化组(F=53.31～234.55,P<0.05);第4、6天分化组穿过trasnswell微孔的细胞表达GCM1的比例均高于未分化组(F=50.25,131.13,P<0.05);分化组中CK7、SDC-1、β-hCG和ITGA5基因的相对表达量均显著高于未分化组(t=-6.78～-2.51,P<0.05);分化组第2、4、6天培养基中雌二醇、孕酮浓度均高于未分化组(F=25.06～225.62,P<0.05).结论 本研究成功分离获取的hTSCs具有正常核型,均表达hTSCs特异标记物,其侵袭能力、分化能力及分泌功能等与人类早期胎盘滋养层细胞相似.这将为进一步研究人类滋养层细胞的发育和功能提供有力的工具.
文献关键词：
滋养层;胎儿干细胞;细胞培养技术;细胞分离;生物标记;核型分析;细胞分化
中图分类号：
作者姓名：
陈娟;马征来;卢永收;潘文霞;武传叶;孙美英;李超
作者机构：
青岛大学附属医院产科,山东 青岛 266003;临沂市妇幼保健院产科
文献出处：
引用格式：
[1]陈娟;马征来;卢永收;潘文霞;武传叶;孙美英;李超-.人滋养层干细胞的分离培养与鉴定)[J].精准医学杂志,2022(06):539-544
A类：
滋养层干细胞,hTSCs,trasnswell,GCM1,胎儿干细胞
B类：
分离培养,体外培养,细胞系,临沂市,妇幼保健院,生殖医学,医学科,捐赠,囊胚,延时,细胞核,核型分析,免疫荧光技术,qPCR,标记物,侵袭能力,分化能力,内分泌功能,TFAP2C,细胞角蛋白,CK7,结合蛋白,稳定表达,GATA3,TEAD4,相对表达量,穿过,微孔,细胞数量,未分,天分,SDC,hCG,ITGA5,雌二醇,孕酮,功分,胎盘滋养层细胞,细胞培养技术,细胞分离,生物标记,细胞分化
AB值：
0.263627
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