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典型文献
miR-142-5p靶向MCL-1对胆管癌细胞上皮-间质转化及吉西他滨化疗敏感性的影响
文献摘要:
目的 探讨miR-142-5p靶向髓细胞白血病因子1(myeloid cell leukemin-1,MCL-1)对人胆管癌细胞QBC939上皮间质化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及吉西他滨(Gemcitabine,GEM)化疗敏感性的影响.方法 体外培养胆管癌细胞QBC939及人正常胆管上皮细胞HIBEC,随机分为对照组、miR-142-5p阴性对照(NC)组和miR-142-5p模拟物(mimics)组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组QBC939细胞和HIBEC细胞中miR-142-5p和MCL-1 mRNA表达情况;划痕实验和Transwell实验分别检测各组QBC939细胞迁移和侵袭变化情况;蛋白印迹分析法检测各组QBC939细胞上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达变化;双荧光素酶报告实验验证miR-142-5p与MCL-1的靶向关系;使用浓度为0.625μg/mL GEM处理转染miR-142-5p后的QBC939细胞,同时设置对照组,MTT检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡.结果 与人正常胆管细胞HIBEC相比,胆管癌细胞QBC939中miR-142-5p呈低表达,MCL-1 mRNA呈高表达.经Targetscan Human数据库预测显示,miR-142-5p与MCL-1 mRNA 3'UTR区有结合位点.与MCL-1-3'UTR-WT+miR-142-5p NC组比较,MCL-1-3'UTR-WT+miR-142-5p mimics组荧光素酶活性降低(P<0.05).与对照组和miR-142-5p NC组相比,miR-142-5p mimics组QBC939细胞miR-142-5p表达水平、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),MCL-1 mRNA和蛋白表达、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平显著降低(P<0.05),细胞迁移、侵袭能力显著减弱(P<0.05);与miR-142-5p NC+GEM组相比,miR-142-5p mimics+GEM组QBC939细胞存活率显著降低,凋亡率增加(P<0.05).结论 过表达miR-142-5p可通过靶向抑制MCL-1表达从而抑制人胆管癌细胞的EMT、增加胆管癌细胞对GEM的化疗敏感性.
文献关键词:
miR-142-5p;髓细胞白血病因子1;胆管癌细胞;上皮间质转化
作者姓名:
刘宁;吴胜利;马富平;张大闯
作者机构:
咸阳市中心医院肝胆二科 陕西省咸阳市, 712000;西安交通大学第一附属医院肝胆外科 西安市, 710061
引用格式:
[1]刘宁;吴胜利;马富平;张大闯-.miR-142-5p靶向MCL-1对胆管癌细胞上皮-间质转化及吉西他滨化疗敏感性的影响)[J].医学分子生物学杂志,2022(03):200-205
A类:
leukemin,Gemcitabine,NC+GEM,mimics+GEM
B类:
5p,MCL,胆管癌细胞,吉西他滨化疗,化疗敏感性,白血病,myeloid,cell,人胆管癌,QBC939,上皮间质化,epithelial,mesenchymal,transition,EMT,体外培养,胆管上皮细胞,HIBEC,qPCR,划痕实验,Transwell,细胞迁移和侵袭,蛋白印迹,上皮型钙黏蛋白,cadherin,神经性,黏附蛋白,波形蛋白,Vimentin,表达变化,双荧光素酶报告实验,转染,MTT,Annexin,FITC,试剂盒,胆管细胞,低表达,Targetscan,Human,UTR,结合位点,WT+miR,荧光素酶活性,蛋白表达水平,侵袭能力,细胞存活率,凋亡率,过表达,靶向抑制,上皮间质转化
AB值:
0.224719
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