典型文献
不同DNA聚合酶突变体与野生型检测性能的比较分析
文献摘要:
目的 将Taq DNA聚合酶(Taq酶)不同的突变体与其野生型进行对比,分析二者扩增性能及聚合性能的差异,探讨突变型Taq酶在乙型、丙型肝炎病毒患者临床检测中的性能优势.方法 提取DNA构建突变库,逐步筛选出热稳定性提高且扩增效率较高的突变体;选取威海市立医院2020年1月至2021年8月收治的乙型肝炎病毒表面抗原阳性样本30例、丙型肝炎HCV RNA阳性样本30例,通过PCR?荧光探针法应用Taq酶突变体与野生型进行性能检测.结果 在同等PCR循环次数下,Taq酶突变体CT值均低于野生型,即突变体的扩增效率高于野生型;对临床样本进行3次重复检测,突变体标准曲线的相关系数为0.99;将Taq酶突变体进行重复检测,批内及批间的检测浓度对数值的变异系数(CV%)均小于5%.结论 不同DNA聚合酶的突变体与野生型相比具有较高的扩增活性及扩增效率,灵敏度及特异性的优势也较为显著.这一特性为进一步研究开发扩增效率更高的DNA聚合酶,推动现代分子生物检测技术、辅助乙肝及丙肝病毒临床检测的发展打下基础.
文献关键词:
DNA聚合酶;突变体;野生型;扩增效能
中图分类号:
作者姓名:
孙梅;葛丽娜;谢龙;宋宇;林子钰;丛海燕;刘鹏;张焕虎;迟翔宇;王明义
作者机构:
威海市立医院中心实验室,山东,威海264200;大连医科大学检验医学院,辽宁,大连116044;卫生部医药生物工程技术研究中心,临床医学分子诊断国家地方联合工程实验室,广东省核酸分子诊断工程技术研究中心,广东省临床医学分子诊断工程技术中心,广州达安基因股份有限公司,广东,广州 510665;威海威高生物科技有限公司,山东,威海264200
文献出处:
引用格式:
[1]孙梅;葛丽娜;谢龙;宋宇;林子钰;丛海燕;刘鹏;张焕虎;迟翔宇;王明义-.不同DNA聚合酶突变体与野生型检测性能的比较分析)[J].分子诊断与治疗杂志,2022(02):197-200
A类:
扩增效能
B类:
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AB值:
0.237764
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