目的:明确牙周炎中TLR2的表达变化,及对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)增殖和成骨分化的影响.筛选调控人牙周膜干细胞Toll样受体2表达的miRNA.方法:收集阻生第三磨牙正常牙周组织和牙周炎患者炎性牙周组织,RT-qPCR检测TLR2表达水平.TLR2小干扰RNA(si-TLR2)和阴性对照(si-NC)分别转染hPDLSCs,CCK-8测定和克隆形成实验检测hPDLSCs增殖能力;茜素红染色和蛋白免疫印迹测定OCN蛋白表达水平,评价hPDLSCs成骨分化能力.TargetScan预测靶向TLR2的miRNA,基因表达综合数据库鉴定健康牙周膜干细胞和炎症牙周膜干细胞之间差异表达miRNA.将数据进行交集处理,筛选出交集miRNA.RT-qPCR检测正常牙周组织和炎性牙周组织之间交集miRNA表达水平,获得表达量最具显著性差异的miRNA.分析TLR2与此miRNA表达的相关性.结果:与正常牙周组织相比,炎性牙周组织中TLR2表达显著上调(P<0.05).与si-NC组比较,si-TLR2组细胞增殖能力显著增强(P<0.05),细胞克隆形成率显著增高(P<0.05).同时si-TLR2组细胞矿化结节形成数量显著多于si-NC组(P<0.05),OCN蛋白表达水平亦显著高于si-NC组(P<0.05).生物信息学分析获得3种miRNA,分别为miR-548d-5p、miR-548am-5p和miR-504-3p.RT-qPCR结果显示,miR-548d-5p表达在正常牙周组织和炎性牙周组织之间差异最为显著.相关性分析显示TLR2的表达与miR-548d-5p表达呈负相关.结论:TLR2在牙周炎组织中表达上调.下调TLR2可促进hPDLSCs的细胞增殖和成骨分化.miR-548d-5p是TLR2的负性上游调节因子.

Toll样受体2;牙周膜干细胞;miRNA

于飞;叶惟虎

华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心 湖北 武汉 430030

临床口腔医学杂志

[1]于飞;叶惟虎-.牙周炎中Toll样受体2的表达及其靶向miRNA的筛选)[J].临床口腔医学杂志,2022(06):331-334

548d,548am

牙周炎,Toll,样受体,miRNA,TLR2,表达变化,人牙周膜干细胞,human,periodontal,ligament,stem,cells,hPDLSCs,成骨分化,选调,阻生第三磨牙,牙周组织,qPCR,小干扰,si,NC,转染,CCK,实验检测,茜素红,蛋白免疫印迹,OCN,蛋白表达水平,分化能力,TargetScan,基因表达综合数据库,差异表达,交集,细胞增殖能力,细胞克隆形成,细胞矿化,矿化结节,生物信息学分析,5p,3p,组织中表达,负性,调节因子

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