目的 研究微小RNA-155(miR-155)/磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)在高糖诱导视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)凋亡中的作用及机制.方法 培养HRCEC并分为miR-NC组、miR-NC+高糖组、miR-155+高糖组、miR-NC+空白质粒组、miR-NC+空白质粒+高糖组、miR-155+空白质粒组+高糖组、miR-155+PTEN质粒组+高糖组,转染阴性对照(NC)序列、miR-155模拟物、空白质粒、PTEN质粒.转染后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-155表达水平,四唑氮化合物(MTS)法检测细胞活力,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡率,Western Blot检测PTEN、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达水平,双荧光素酶报告基因验证miR-155靶向PTEN基因mRNA3'UTR.结果 (1)miR-155表达:与miR-NC+高糖组比较,转染miR-155模拟物显著增加高糖环境下HRCEC中miR-155的表达,差异具有统计学意义(t=4.069,P=0.004);(2)细胞活力:与miR-NC+高糖组比较,转染miR-155模拟物显著提高高糖环境下HRCEC的OD490水平、抑制细胞凋亡,差异均有统计学意义(tOD490=2.907,P=0.020;t凋亡率=5.957,P=0.000);与miR-155+空白质粒组+高糖组比较,转染miR-155模拟物及PTEN质粒显著降低高糖环境下HRCEC的OD490水平、促进细胞凋亡,差异均有统计学意义(t0D490=3.777,P=0.005;t凋亡率=6.406,P=0.000);(3)PTEN通路:与miR-NC+高糖组比较,转染miR-155模拟物显著抑制高糖环境下HRCEC中PTEN的表达,增加p-AKT、eNOS的表达,差异均有统计学意义(tPTEN=3.855,P=0.005;tp-AKT=6.450,P=0.000;teNOS=4.875,P=0.001).结论 高糖环境下HRCEC凋亡激活且miR-155表达减少、PTEN表达增加,过表达miR-155能够靶向抑制PTEN并抑制高糖诱导的HRCEC凋亡.

糖尿病视网膜病变;视网膜微血管内皮细胞;miR-155;凋亡;磷脂酶和张力蛋白同源物;靶基因

蔡文丽;谢红波

徐州市中医院,徐州221000;青岛妇女儿童医院,青岛266034

中国中医眼科杂志

[1]蔡文丽;谢红波-.miR-155/PTEN轴在高糖诱导HRCEC凋亡中的作用及机制)[J].中国中医眼科杂志,2022(05):337-342,363

HRCEC,磷脂酶和张力蛋白同源物,155+,155+PTEN,mRNA3,tOD490,t0D490,tPTEN,teNOS

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