为探究腹泻猕猴粪便中分离出的大肠杆菌(E.coli)是否携带高致病性毒力岛(HPI)相关基因,并分析其耐药性和致病性,本试验采集23只腹泻猕猴的粪便,用麦康凯培养基、LB琼脂和生化鉴定管对E.coli进行分离鉴定,通过PCR试验、纸片扩散法和动物回归试验,研究分离菌株的HPI基因携带情况、耐药性、致病性,并且进行全基因组测序验证.结果显示,23份样品中均分离出E.coli,分离率为100％;分离出的E.coli中HPI标志基因irp2携带率高达47.83％,其余基因irp1、irp3、irp4、irp5、irp6、irp7、irp8、irp9、fyuA、intB 和 ybtA 携带率分别为 65.22％、34.78％、47.83％、69.57％、56.62％、43.48％、39.13％、43.48％、34.78％、65.22％和26.09％;在分离出的23株E.coli菌株中携带HPI全岛基因的有5株,占21.74％,这5株E.coli HPI阳性菌株(HPI+)对阿米卡星、环丙沙星、头孢哌酮、头孢噻肟、苯唑西林、四环素、头孢唑林、头孢曲松的耐药性都极高,对氯霉素较敏感;接种E.coli HPI+菌株后8 h小鼠死亡率为100％,接种E.coli HPI-菌株后12 h小鼠死亡率为25％;用2株E.coli HPI+全基因检测的结果构建了 2个基因组圈图,其中1株(H-7)预测到5 300个编码基因,其总长4 728 917 bp;另1株(H-23)预测到5 460个编码基因,其总长4 811 637 bp.结果表明,猕猴腹泻源致病性E.coli HPI基因携带率较高、耐药性普遍存在,同时致病性E.coli HPI+可提高小鼠死亡率,本试验通过COG、GO、KEGG获得大量的基因功能注释结果,从基因组水平加深了对E.coli HPI+的认识.

猕猴;腹泻;大肠杆菌;高致病性毒力岛(HPI);耐药性;致病性

韩冬梅;陈柄汛;赵维薇;万全;邓静;王喜;张博;吕龙宝;肖鹏;高洪

云南农业大学动物医学院,云南昆明650201;中国科学院昆明动物研究所,云南昆明650201;云南农业大学食品科学技术学院,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201

中国兽医杂志

[1]韩冬梅;陈柄汛;赵维薇;万全;邓静;王喜;张博;吕龙宝;肖鹏;高洪-.猕猴源大肠杆菌药敏试验与高致病性毒力岛基因的检测)[J].中国兽医杂志,2022(10):53-61,67

irp1,irp3,irp4,irp5,irp6,irp7,irp8,irp9,intB,ybtA,HPI+

猕猴,大肠杆菌,药敏试验,高致病性,毒力岛,粪便,coli,耐药性,LB,琼脂,生化鉴定,分离鉴定,纸片扩散法,动物回归试验,分离菌株,全基因组测序,分离率,标志基因,irp2,携带率,fyuA,全岛,阳性菌,阿米卡星,环丙沙星,头孢哌酮,头孢噻肟,西林,四环素,头孢唑林,头孢曲松,氯霉素,基因检测,圈图,编码基因,总长,bp,高小,COG,基因功能注释

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