典型文献
基于毛细管电泳法-指数富集配体系统进化筛选维吉霉素M1适配体及其检测应用
文献摘要：
毛细管电泳(Capillary electrophoresis,CE)是一种高效筛选核酸适配体的方法,具有分离效率高、样品用量少、筛选成本低等特点.本研究基于毛细管电泳-指数富集配体系统进化技术(CE-SELEX)建立了维吉霉素M1(VGM-M1)适配体的筛选方法.将初始ssDNA库与VGM-M1混合孵育,通过毛细管电泳-紫外检测器(CE-UV)分离并收集结合物,通过PCR扩增和ssDNA制备,得到下一轮的子库ssDNA.经过4轮筛选后,获得富集程度较高的前10条候选适配体序列,选择富集程度最高的前4条候选序列进行亲和力及特异性评估,得到亲和力最大以及特异性最强的VGM-M1适配体Seq 1,其平衡常数(Kd)为49 nmol/L.将适配体Seq 1进行结构修饰改造,得到剪短候选适配体序列,并对其进行亲和力以及特异性评估.结果表明,结构修饰后的适配体Seq 1-1具有更高的亲和力及特异性,其Kd低至45 nmol/L.使用竞争性酶联适配体可视化检测方法对VGM-M1进行检测,检出限低至51 ng/mL,低于国标对VGM-M1的最高残留限量(100μg/L).进一步对牛奶中VGM-M1进行检测,加标回收率达到97.8％ ～103.2％.研究结果表明,基于CE-SELEX筛选的适配体Seq 1-1可特异性识别VGM-M1,可以应用于实际样品中VGM-M1的检测.
文献关键词：
维吉霉素M1;核酸适配体;毛细管电泳;毛细管电泳-指数富集配体系统进化技术
中图分类号：
作者姓名：
蔡先洪;孙强;吴谦;叶浩楠;巫沁芳;区文卉;陈锦灿;陈兰美
作者机构：
广东医科大学药学院,湛江524023;广东医科大学海洋医药研究院,湛江524023;广东湛江海洋医药研究院,湛江524023;南方海洋科学与工程广东省实验室,湛江524023
文献出处：
引用格式：
[1]蔡先洪;孙强;吴谦;叶浩楠;巫沁芳;区文卉;陈锦灿;陈兰美-.基于毛细管电泳法-指数富集配体系统进化筛选维吉霉素M1适配体及其检测应用)[J].分析化学,2022(05):728-738,中插7-中插11
A类：
B类：
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AB值：
0.258794
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