采用普鲁士蓝(PB)和硫堇(Thi)两种电化学信号物质,同时引入核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)辅助目标循环和杂交链式反应(HCR)两种信号放大策略,构建了一种超灵敏比率型电化学生物传感器,用于BCR/ABL融合基因的检测.首先,通过恒电位沉积法在玻碳电极表面形成一层普鲁士蓝(PB)薄膜,在其上固定捕获DNA.然后,将发夹DNA(H1)与目标DNA杂交配对,在ExoⅢ作用下,目标DNA被释放,可进入下一次循环,同时释放出发夹DNA的部分单链片段(Trigger-DNA),此单链可被PB膜和辅助DNA修饰电极捕获,继而在此修饰电极表面进行HCR反应,形成典型的Y形线性DNA串联体.此时,PB的电化学信号降低;另一方面,形成的串联体与Thi通过静电作用结合后,呈现高的Thi电化学响应.Thi和PB的电流响应信号比值(IT/IP)的对数与目标DNA的浓度对数在1 pmol/L～100 nmol/L范围内具有良好的线性关系,线性方程为lg(IT/IP)=1.094×lgC+0.156,检出限为0.19 pmol/L.本方法对BCR/ABL融合基因具有较高的选择性.此比率型电化学生物传感器为慢性粒细胞白血病(CML)的诊断和预后提供了一种简单可行的策略.

比率型电化学生物传感器;BCR/ABL融合基因;核酸外切酶Ⅲ辅助目标循环;杂交链式反应;慢性粒细胞白血病

陈美君;刘雅兰;王颖;戈芷琪;张修华;王升富;何汉平

湖北大学化学化工学院,武汉430062;湖北大学省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室,武汉430062

分析化学

[1]陈美君;刘雅兰;王颖;戈芷琪;张修华;王升富;何汉平-.新型比率型电化学生物传感器的构建及对BCR/ABL融合基因的检测)[J].分析化学,2022(05):692-700,中插3-中插6

比率型电化学生物传感器,杂交配对,lgC+0

BCR,ABL,融合基因,普鲁士蓝,PB,硫堇,Thi,电化学信号,化学信号物质,核酸外切酶,Exo,杂交链式反应,HCR,信号放大,超灵,恒电位沉积,沉积法,玻碳电极,发夹,H1,释放出,单链,Trigger,修饰电极,串联体,静电作用,响应信号,IT,pmol,nmol,线性方程,检出限,慢性粒细胞白血病,CML,诊断和预后

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