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H1N1流感病毒HA蛋白疫苗构建策略的筛选
文献摘要：
目的 筛选并确立流感病毒H1N1 A/Nebraska/14/2019血凝素(HA)的最佳蛋白疫苗策略.方法 分别构建HA全长、HA胞外区C端不同的突变体及共表达HA/M1的重组杆状病毒,感染昆虫细胞表达80 h后,收取培养上清,Western blot鉴定重组抗原的表达,同时采用血凝试验间接分析其免疫原性.然后大量表达HA/M1蛋白,Core700纯化后分析蛋白颗粒的理化性质、血凝活性及稳定性.结果 2种HA胞外区的C端突变体虽均以三聚体形式表达,但表达上清无血凝活性;HA全长三聚体具有较好的血凝活性,但为膜蛋白,纯化难度大.HA/M1共表达上清具有血凝活性,HA/M1表达上清经Core700纯化,透射电子显微镜分析显示为80 nm～150 nm病毒样颗粒(VLP).HA-M1?VLP的血凝效价高达26,动态光散射显示HA?M1?VLP在4℃保存3个月性质稳定.结论 HA?M1?VLP易于表达纯化、稳定性好,且血凝活性高,可用于流感病毒H1N1蛋白疫苗的研究.
文献关键词：
H1N1;血凝素(HA);基质蛋白(M1);病毒样颗粒(VLP)
中图分类号：
作者姓名：
郑宁晨;杨姣姣;张婷;王志荣;许雪梅
作者机构：
中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 生物物理及结构生物学系,北京100005
文献出处：
引用格式：
[1]郑宁晨;杨姣姣;张婷;王志荣;许雪梅-.H1N1流感病毒HA蛋白疫苗构建策略的筛选)[J].基础医学与临床,2022(12):1885-1890
A类：
Nebraska,Core700
B类：
H1N1,流感病毒,HA,蛋白疫苗,构建策略,血凝素,全长,胞外区,突变体,共表达,M1,重组杆状病毒,昆虫细胞表达,收取,养上,blot,重组抗原,用血,免疫原性,血凝活性,三聚体,膜蛋白,上清经,透射电子显微镜,显微镜分析,病毒样颗粒,VLP,效价,价高,动态光散射,表达纯化,基质蛋白
AB值：
0.260461
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