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SFTSV Gn关键氨基酸突变对细胞自噬与病毒增殖的影响
文献摘要：
目的 探究发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)中Gn蛋白关键氨基酸突变(I323V)对细胞活性以及病毒复制的影响,并通过检测 自噬相关蛋白水平推测其可能机制.方法 利用定点突变和同源重组技术构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-Gn和pcDNA3.1(+)-Gn(I323V).验证其在BSR-T7/5细胞中成功表达后,检测SFTSV Gn对细胞活性、病毒复制和细胞自噬的影响.结果 双酶切鉴定和序列测定证实成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-Gn和pcDNA3.1(+)-Gn(I323V).间接免疫荧光和Western Blot结果表明Gn和Gn(I323 V)成功表达.过表达Gn对病毒复制无明显影响,但表达Gn(I323V)后病毒增殖速率明显降低;Gn和Gn(I323 V)的表达可不同程度降低细胞存活率(P＜0.05),并引起细胞内 自噬相关蛋白LC3 Ⅱ和p62表达增多(P＜0.05).结论 SFTSV Gn可能是通过抑制 自噬流从而影响细胞活性,且第323位氨基酸突变对宿主细胞和病毒复制有明显影响.
文献关键词：
SFTSV;Gn;BSR-T7/5细胞;突变
中图分类号：
作者姓名：
陈梦婷;邱玲;杜蒙育;徐小莹;韦雪敏;崇小文;温红玲
作者机构：
山东大学齐鲁医学院公共卫生学院微生物检验学系,山东省"十三五"高等学校感染性疾病防控重点实验室,济南250012;山东省公共卫生临床中心感染科,济南 250101
文献出处：
引用格式：
[1]陈梦婷;邱玲;杜蒙育;徐小莹;韦雪敏;崇小文;温红玲-.SFTSV Gn关键氨基酸突变对细胞自噬与病毒增殖的影响)[J].中国人兽共患病学报,2022(12):1080-1086
A类：
I323V,I323
B类：
SFTSV,Gn,氨基酸突变,细胞自噬,病毒增殖,发热伴血小板减少综合征病毒,细胞活性,病毒复制,自噬相关蛋白,可能机制,定点突变,同源重组,重组技术,技术构建,真核表达载体,pcDNA3,BSR,T7,双酶,序列测定,间接免疫荧光,Blot,过表达,可不,细胞存活率,LC3,p62,自噬流,宿主,主细胞
AB值：
0.249207
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