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典型文献
日本血吸虫带电多泡体蛋白5的生物学特性研究
文献摘要:
目的 克隆、表达 日本血吸虫(Schistosoma japonicum,S.japonicum)带电多泡体蛋白5(CHMP5),并对其生物学特性进行研究.方法 利用PCR扩增S.japonicum CHMP5基因 目的片段,构建重组质粒pET28a(+)-CHMP5,并对该基因进行生物信息学分析.利用荧光定量PCR检测CHMP5在不同时期虫体中的转录水平.对体外表达的重组CHMP5蛋白进行纯化与质谱鉴定,并通过Western blotting检测其反应原性.利用免疫组化实验分析CHMP5在虫体中的分布.以小鼠为动物模型,评估重组CHMP5蛋白抗日本血吸虫病的免疫保护效果.结果 S.japonicum CHMP5的开放阅读框为675 bp,编码224个氨基酸,具有6个B细胞抗原表位;主要定位于S.japonicum虫体的体被上.CHMP5基因在35 d和42 d虫体中的转录水平高于其它检测时期,且42 d雌虫中的转录水平约是42 d雄虫的3倍.克隆表达的重组CHMP5蛋白其理论分子量约为29 kDa,具有较好的反应原性;用其免疫小鼠24 d,即可使小鼠产生较高水平的IgG抗体,并最终诱导产生18.96%的减虫率和42.98%的肝脏减卵率.结论 成功克隆、表达了 S.japonicum体被蛋白CHMP5,其在不同发育时期虫体中均有表达,获得的重组CHMP5蛋白可诱导小鼠产生部分的免疫保护效果,为深入探讨S.japonicum CHMP5的生物学功能提供了基础.
文献关键词:
日本血吸虫;带电多泡体蛋白5;转录水平;组织定位;免疫保护
作者姓名:
张旻;傅志强;林矫矫;洪炀
作者机构:
河南科技大学动物科技学院,洛阳 471023;中国农业科学院上海兽医研究所,国家动物血吸虫病参考实验室,上海 200241;中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心),国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,上海 200025
引用格式:
[1]张旻;傅志强;林矫矫;洪炀-.日本血吸虫带电多泡体蛋白5的生物学特性研究)[J].中国人兽共患病学报,2022(09):764-770
A类:
CHMP5
B类:
带电,生物学特性,Schistosoma,japonicum,重组质粒,pET28a,生物信息学分析,虫体,转录水平,体外表达,质谱鉴定,blotting,反应原性,免疫组化,化实验,动物模型,抗日,日本血吸虫病,免疫保护效果,开放阅读框,bp,抗原表位,克隆表达,分子量,kDa,IgG,不同发育时期,生物学功能,组织定位
AB值:
0.213859
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