典型文献
利用PLDMV/Twin-Strep侵染性克隆纯化HC-Pro病毒蛋白
文献摘要：
番木瓜畸形花叶病毒(Papaya leaf distortion mosaic virus,PLDMV)是一种新的潜在威胁番木瓜种植业的病毒,其辅助成分蛋白酶(helper component-proteinase,HC-Pro)是PLDMV编码参与病毒复制、运动、寄主植物症状表现的多功能蛋白,因此纯化获得具有功能活性的HC-Pro蛋白,研究其多功能性具有重要意义.本研究利用In-Fusion拼接策略和E.coli Cell-Free快速构建植物病毒侵染性克隆法,一步快速地将28个氨基酸组成的蛋白标签Twin-Strep插入到PLDMV HC-Pro氨基端,成功获得了基于农杆菌的携带Twin-Strep标签的PLDMV侵染性克隆pPLDMV-Strep.通过农杆菌渗透注射接种番木瓜植株,从感染PLDMV-Strep的番木瓜叶片总蛋白中,利用Twin-Strep蛋白标签亲和层析分离纯化获得PLDMV HC-Pro蛋白,并通过LC/ESI-MS/MS(liquid chromatography electrospray ionization tandem mass spectrometric)对其进行蛋白N端和C端序列测序,证明了纯化获得完整的PLDMV HC-Pro蛋白.研究结果为后续解析PLDMV HC-Pro在病毒侵染过程中的功能及与寄主蛋白相互作用奠定了基础.
文献关键词：
番木瓜畸形花叶病毒;HC-Pro;马铃薯Y病毒;蛋白纯化
中图分类号：
作者姓名：
杨秀坤;沈文涛;庹德财;王赫;言普;黎小瑛;朱国鹏;周鹏
作者机构：
海南大学园艺学院/海南省热带园艺作物品质调控重点实验室,海南海口 570228;中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101
文献出处：
引用格式：
[1]杨秀坤;沈文涛;庹德财;王赫;言普;黎小瑛;朱国鹏;周鹏-.利用PLDMV/Twin-Strep侵染性克隆纯化HC-Pro病毒蛋白)[J].热带作物学报,2022(04):684-692
A类：
PLDMV,番木瓜畸形花叶病毒,Papaya,pPLDMV
B类：
Twin,Strep,侵染性克隆,HC,Pro,病毒蛋白,leaf,distortion,mosaic,virus,种植业,helper,component,proteinase,病毒复制,寄主植物,症状表现,功能蛋白,有功,功能活性,多功能性,研究利用,In,Fusion,拼接策略,coli,Cell,Free,快速构建,建植,植物病毒,病毒侵染,氨基酸组成,农杆菌,植株,总蛋白,亲和层析,层析分离,分离纯化,LC,ESI,liquid,chromatography,electrospray,ionization,tandem,mass,spectrometric,侵染过程,蛋白相互作用,马铃薯,蛋白纯化
AB值：
0.326722
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