以体外培养的奶牛中性粒细胞为研究对象,用瑞氏姬姆萨染色和台盼蓝拒染法对分离培养的奶牛外周血中性粒细胞进行鉴定和活性检测,ELISA检测金黄色葡萄球菌感染体外培养的奶牛外周血中性粒细胞IL-1β、TNF-α、IL-10及IL-8的分泌情况,Western blot检测金黄色葡萄球菌感染体外培养的奶牛外周血中性粒细胞中NF-κB的激活效应.结果显示,体外分离培养的奶牛外周血中性粒细胞纯度达99％,随着培养时间增加奶牛外周血中性粒细胞活性逐渐降低.ELISA检测结果显示,在3 h～24 h刺激时间范围内,随着金黄色葡萄球菌刺激时间的增加,与空白对照组相比体外培养的奶牛外周血中性粒细胞中IL-10、TNF-α、IL-1β和IL-8的分泌量均显著升高(P<0.001).Western blot检测结果显示,在15 min～120 min刺激时间范围内,随着SA113感染时间的增加,与空白对照组相比体外培养的奶牛外周血中性粒细胞中IκBα磷酸化水平显著升高(P<0.001).研究结果表明,成功分离培养了奶牛外周血中性粒细胞;金黄色葡萄球菌(SA113株)刺激体外分离培养的奶牛外周血中性粒细胞过程中细胞因子IL-10、TNF-α、IL-1β和IL-8的分泌量随着刺激时间的增加逐渐升高,这一促进作用可能与NF-κB的激活有关,在金黄色葡萄球菌感染奶牛外周血中性粒细胞引发的炎症反应过程中产生调控作用.

金黄色葡萄球菌;外周血中性粒细胞;核因子-κB;细胞因子;奶牛

张凯;姜雪莹;钱英红;曹金山;刘博;张静;毛伟

内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特 010018;农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018;内蒙古自治区农牧业科学院,内蒙古呼和浩特 010018

动物医学进展

[1]张凯;姜雪莹;钱英红;曹金山;刘博;张静;毛伟-.金黄色葡萄球菌体外刺激奶牛外周血中性粒细胞对炎性因子分泌的影响)[J].动物医学进展,2022(08):30-34

SA113

菌体,奶牛,外周血中性粒细胞,炎性因子,体外培养,台盼蓝,分离培养,活性检测,金黄色葡萄球菌感染,blot,外分,培养时间,细胞活性,空白对照,分泌量,磷酸化,功分,反应过程,核因子

0.102976