建立牛布鲁氏菌2308感染小鼠巨噬细胞RAW264.7模型,用RT-qPCR检测感染细胞中TGF-β1在mRNA水平的变化;ELISA检测布鲁氏菌感染细胞后培养上清中TGF-β1、IL-1β和IL-18的释放量;Western blot分析TGF-β1蛋白水平的变化.布鲁氏菌侵染重组外源TGF-β1(rTGF-β1)预孵育的巨噬细胞,检测TGF-β1对炎症因子IL-iβ和IL-18的影响.构建布鲁氏菌感染小鼠模型,建模28 d后,将TGF-β1抗体以浓度为1 μg/mL的剂量尾根静脉注射感染小鼠,分别在注射TGF-β1后第1天、第15天、第30天收集小鼠外周血,ELISA检测小鼠外周血血清中炎性因子IL-18和IL-1β分泌量.与对照组相比,在细菌侵染细胞前期TGF-β1在转录水平表达上调,而在进入细胞后表达下调,细胞上清中TGF-β1的含量显著升高(P＜0.05),且在蛋白水平也出现差异性高表达.预孵育rTGF-β1后布鲁氏菌侵染的巨噬细胞中炎症因子IL-1β和IL-18释放量显著升高(P＜0.05).布鲁氏菌感染小鼠1周～4周后感染组小鼠血清中炎性因子TGF-β1的分泌量显著性低于对照组(P＜0.05),在感染第2周后逐步上升.布鲁氏菌感染小鼠后各脏器有明显的病理变化,免疫组化结果显示TGF-β1在脾脏和肝脏中均有不同程度的表达.TGF-β1抗体的注射能够显著性降低布鲁氏菌感染鼠血清中IL-1β和IL-18的分泌(P＜0.05),布鲁氏菌感染过程中细胞因子TGF-β1分泌增加,外源性TGF-β1显著增加炎性IL-1β和IL-18的产生,而TGF-β1抗体注射布鲁氏菌感染小鼠可以缓解炎症反应.

布鲁氏菌;转化生长因子β1(TGF-β1);炎症因子

陶婷婷;赵天艺;李佳;朱德馨;邱润辉;王梓行;孙志华;张辉

石河子大学动物科技学院,新疆石河子832000;新疆生产建设兵团动物疾病防控重点实验室,新疆石河子832000;动物健康养殖国家国际联合研究中心,新疆石河子832000

动物医学进展

[1]陶婷婷;赵天艺;李佳;朱德馨;邱润辉;王梓行;孙志华;张辉-.TGF-β1在布鲁氏菌致炎过程中的作用及其与NLRP3炎症小体的相关性研究)[J].动物医学进展,2022(02):48-53

rTGF

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